有关猪的IPS问题

cicadacjk

建议你不要选这个题; g' s" i: L0 j+ ], r
目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也好，都没有见到外源不沉默的）。" c$ b" M3 \9 q% o
就算你铁了心要试，也不建议你做腺病毒，小鼠腺病毒文章仅有一篇。从感染效率讲是不低，但重复性是很差的，应当是因为病毒感染导致细胞内部产生不利于重编程的变化。

cicadacjk

个人观点
' h4 N  J$ C8 T9 d# B
5 {3 P! f+ @. h) \6 [* \, u培养条件尚且无法支持猪的胚胎干细胞状态5 S! p+ a7 Z' n  {

, g8 j# N( Y# j3 |9 ]例子：大鼠的ES做了20年
& I3 S! }* `0 m人的ES状态还没被广泛认可

cicadacjk

对于8楼9楼的问题- {! M/ h* \! |( `6 p- Y7 E
我的观点是. i3 n- [1 l, o: q
1. 类小鼠的HES是依靠过表达5个因子维持的，但我们不知道其天然状态到底是跟小鼠一样，还是一种区别于当前mES和hES之外的一种状态。
' R/ }7 `( U+ f( j! K2. 在猪里面尝试得到这种细胞也很有趣，内源是全部开放的，只是在这个基础上组成型表达几个因子。目前尚无类似报道。1 S, C7 C( h% ~) N: Y. j$ i, P- n* E0 N
3. 猴的胚胎操作还比较困难，但我自己推测现在的猴iPS是无法做出嵌合猴的。
4 r. [. @- S3 S$ R/ P3 ]% f! a4. 逆转录病毒沉默是重编程最后期的事件之一，这只能证明所有尝试都还没有进入最后一个阶段。

cicadacjk

回复 15# 张也行 ) l5 A2 w8 ]# e: N, G

4 m! S  `0 [- y, v6 T) Y& s1 `! {1 y- [* [7 J
    看来你已经找到那篇文献了。
3 `* l! q% b: u2 V" |/ ]5 o  J$ p5 P3 T
关于不同物种的ES到底会不会一样，我提几个事实，你可以考虑一下：5 l/ p6 w" c. Q. \& R1 N- E
1. 去年有一篇Science报道Tdh这个酶在小鼠的self-renewal中非常重要，而人的这个酶是失活的，所以人的苏氨酸代谢是走的不一样的通路。如果这个酶很重要，那么人的所谓native ES又怎样维持呢？
( W  i# v6 J# l2. 大鼠的ES固然是建立了，并且获得了p53 KO的大鼠（Ying‘s lab）。但大鼠的iPS仍然没有生殖系传递，甚至丁胜做的嵌合仍然有争议（大鼠的腹部花纹在杂交情况下也会出现黑白相间），难道没有人期望做出一个大鼠的生殖系传递iPS吗？答案是有人在做，而且还不少人在做，但……
; S5 t! m! j- I3. 小鼠的epiES，Dppa3（stella）、Nanog、Rex1(ZFP42）的表达都很低，而human ES都不低，信号通路的requirement不能简单用来区分细胞类型，epiES与hES有共性，但推测他们是一样的，就有点形而上了。