求助：生殖嵴的培养

健康宝宝2006

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高手们帮我看看是培养出来的EG细胞吗，这是培养4天后照的

健康宝宝2006

总感觉不是胚胎生殖细胞的克隆，因为刚培养4天，跟文献中7-8天出现明显的克隆有些差距，而且克隆周围的细胞好像不太像是饲养层细胞了，那位高手帮我看看，谢谢了！！

7ubo

培养生殖嵴干什么啊？

健康宝宝2006

是培养生殖嵴里的原始生殖细胞

白衣小彩

你可以做APK染色看看，或者OCT-4，PGCS没有干性，如果OCT-4阳性那就是啦！口说无凭

hualin840518

回复 1# 健康宝宝2006
2 e, r! N% J3 G9 p: S+ L/ M3 ^* z0 J+ p- E2 h6 ]

: G3 n8 v" W3 j    从图上看，培养的效果还是可以的！
5 ?* t3 r7 @& ]不过似乎细胞不纯或者是不太干净，建议你换下培养液！) e7 f9 N3 t$ I2 r. d
不过，就像“白衣小彩”说的那样，要是做一下你可以做APK染色看看，或者OCT-4，PGCS没有干性，如果OCT-4阳性，就能从实质上鉴定了！
! x, Z0 |6 [1 e5 J目前只培养了4天，建议你在培养几天看看！

大猪小猪落玉盘

1、不清楚你养的是那个物种的？' K0 |, q& T* x2 O- V
2、饲养层是不是太密了？7 U) v$ F* Z7 Y' H0 Q/ ~9 ^
3、这种克隆看起来是，能不能传下去，多观察看它能不能继续长大& f) v$ L7 S& R" n1 d
4、即使是克隆，这种克隆估计不是很纯

健康宝宝2006

感谢楼上各位的回复，尤其是两位版主的精彩点评！！我取的是小鼠的生殖嵴，还有两个问题想请教各位：1 在文献中看到说EG细胞克隆在7-8天形成，10天克隆典型，在接种生殖嵴后隔天换液，可是没提到是否传代的事，我不明白如果不传代的话，饲养层能挺10天吗？
, K# K7 K# U# x- h& e 2 培养小鼠PGC都是取13.5dpc 以前的胚胎，13.5dpc 以后PGC会向生殖细胞分化，不知道如果取13.5dpc 以后的胚胎生殖嵴培养，会得到什么，能是精原干细胞吗？
& E, [# W! w- J4 g* @; h4 G! ?  希望高手给予指点，谢谢！！

白衣小彩

文献上是说克隆在7-8天形成，10天典型，但好像也分不同培养条件吧。不同的饲养层细胞，和培养液。关于传代文献里没见给具体的时机，只说克隆比较多时传代，太长时间不传代的话不是饲养层能不能挺的问题，而是你养的EG就产生分化了。

esc123esc

没养过生殖干细胞，不知道13.5dpc之前的小鼠胎儿生殖脊要怎么取啊，哪位高手讲一讲~