求助：生殖嵴的培养

健康宝宝2006

) P# L4 b9 D7 }, l高手们帮我看看是培养出来的EG细胞吗，这是培养4天后照的

健康宝宝2006

总感觉不是胚胎生殖细胞的克隆，因为刚培养4天，跟文献中7-8天出现明显的克隆有些差距，而且克隆周围的细胞好像不太像是饲养层细胞了，那位高手帮我看看，谢谢了！！

7ubo

培养生殖嵴干什么啊？

健康宝宝2006

是培养生殖嵴里的原始生殖细胞

白衣小彩

你可以做APK染色看看，或者OCT-4，PGCS没有干性，如果OCT-4阳性那就是啦！口说无凭

hualin840518

回复 1# 健康宝宝2006 : y- s' n4 d7 d8 \% h$ H
4 @/ p% W; V$ [

% I" [  P8 [+ f$ U8 l- h5 t    从图上看，培养的效果还是可以的！" w' ?) w/ ^9 Z, d. x9 V" I+ m: N
不过似乎细胞不纯或者是不太干净，建议你换下培养液！
3 q1 M! i/ ?9 g* m" R不过，就像“白衣小彩”说的那样，要是做一下你可以做APK染色看看，或者OCT-4，PGCS没有干性，如果OCT-4阳性，就能从实质上鉴定了！& J: B2 v* h# Y; F
目前只培养了4天，建议你在培养几天看看！

大猪小猪落玉盘

1、不清楚你养的是那个物种的？
: ^1 x( b% w. O0 X' H2、饲养层是不是太密了？5 j3 i5 N& g; k4 G0 U! Y( C* V
3、这种克隆看起来是，能不能传下去，多观察看它能不能继续长大
- I& n- \4 `' i7 G& P: R4、即使是克隆，这种克隆估计不是很纯

健康宝宝2006

感谢楼上各位的回复，尤其是两位版主的精彩点评！！我取的是小鼠的生殖嵴，还有两个问题想请教各位：1 在文献中看到说EG细胞克隆在7-8天形成，10天克隆典型，在接种生殖嵴后隔天换液，可是没提到是否传代的事，我不明白如果不传代的话，饲养层能挺10天吗？7 Z$ q1 f. |: Q$ }$ I
2 培养小鼠PGC都是取13.5dpc 以前的胚胎，13.5dpc 以后PGC会向生殖细胞分化，不知道如果取13.5dpc 以后的胚胎生殖嵴培养，会得到什么，能是精原干细胞吗？
7 s6 J* V+ h* E/ L4 l4 b  希望高手给予指点，谢谢！！

白衣小彩

文献上是说克隆在7-8天形成，10天典型，但好像也分不同培养条件吧。不同的饲养层细胞，和培养液。关于传代文献里没见给具体的时机，只说克隆比较多时传代，太长时间不传代的话不是饲养层能不能挺的问题，而是你养的EG就产生分化了。

esc123esc

没养过生殖干细胞，不知道13.5dpc之前的小鼠胎儿生殖脊要怎么取啊，哪位高手讲一讲~