求助：生殖嵴的培养

健康宝宝2006

8 m' Q) h2 I( z; K' e
高手们帮我看看是培养出来的EG细胞吗，这是培养4天后照的

健康宝宝2006

总感觉不是胚胎生殖细胞的克隆，因为刚培养4天，跟文献中7-8天出现明显的克隆有些差距，而且克隆周围的细胞好像不太像是饲养层细胞了，那位高手帮我看看，谢谢了！！

7ubo

培养生殖嵴干什么啊？

健康宝宝2006

是培养生殖嵴里的原始生殖细胞

白衣小彩

你可以做APK染色看看，或者OCT-4，PGCS没有干性，如果OCT-4阳性那就是啦！口说无凭

hualin840518

回复 1# 健康宝宝2006
; x4 z8 I- J3 [9 \& e+ [/ g+ R8 x1 S: B
, U: i6 V0 R2 w: `* g! A8 Z: a
    从图上看，培养的效果还是可以的！
; {0 Y. ^+ {$ {, ^" z. }/ u% x3 E$ Q不过似乎细胞不纯或者是不太干净，建议你换下培养液！
  d/ ]- A6 R; v9 J& k" g: k5 f6 T1 r不过，就像“白衣小彩”说的那样，要是做一下你可以做APK染色看看，或者OCT-4，PGCS没有干性，如果OCT-4阳性，就能从实质上鉴定了！6 N5 h. c% {% N% U# Z# w6 R  r
目前只培养了4天，建议你在培养几天看看！

大猪小猪落玉盘

1、不清楚你养的是那个物种的？" E0 o) F5 k4 s( S
2、饲养层是不是太密了？6 p2 I& J. u# q! Y2 Z
3、这种克隆看起来是，能不能传下去，多观察看它能不能继续长大
" @4 O! X- ?2 s4、即使是克隆，这种克隆估计不是很纯

健康宝宝2006

感谢楼上各位的回复，尤其是两位版主的精彩点评！！我取的是小鼠的生殖嵴，还有两个问题想请教各位：1 在文献中看到说EG细胞克隆在7-8天形成，10天克隆典型，在接种生殖嵴后隔天换液，可是没提到是否传代的事，我不明白如果不传代的话，饲养层能挺10天吗？# P  D3 G" u2 O2 [. L: Q
2 培养小鼠PGC都是取13.5dpc 以前的胚胎，13.5dpc 以后PGC会向生殖细胞分化，不知道如果取13.5dpc 以后的胚胎生殖嵴培养，会得到什么，能是精原干细胞吗？; t9 x. i$ q# s
  希望高手给予指点，谢谢！！

白衣小彩

文献上是说克隆在7-8天形成，10天典型，但好像也分不同培养条件吧。不同的饲养层细胞，和培养液。关于传代文献里没见给具体的时机，只说克隆比较多时传代，太长时间不传代的话不是饲养层能不能挺的问题，而是你养的EG就产生分化了。

esc123esc

没养过生殖干细胞，不知道13.5dpc之前的小鼠胎儿生殖脊要怎么取啊，哪位高手讲一讲~