求助，原代神经干细胞的具体步骤。

jennyshy

原代方法步骤，文章中有好多，就不多说了，我这里就说一点要点的东西：一是取材的部位要准确，比如海马区；二是取的组织不能粘附血丝一些的东西，会导致后续培养出现成纤维细胞或者培养的细胞很脏，而且也比较难除去；三是将组织打散或者消化再吹到成单细胞的手法要轻柔，不要弄出很多泡沫，吸管或者用枪吹都需要抵住管底部，剪切力大效果也好；四是细胞种植的密度一定要把握好，太密太稀结果都不好。: t0 G, R9 t8 d/ n

$ o2 K# X/ q* Y5 ^' G干细胞原代不太好养，多多练习，多多积累经验……我以前也失败过好多次，慢慢熟悉这细胞的特性就好了。

jennyshy

回复 7# xfyang2007123 8 E( U1 M6 J3 w3 V/ K# y9 n; K
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幼年鼠比胎鼠杂质多，除了取材时要尽量弄干净些，还有就是过过筛网，再就是半量换液去除一部分杂质，不能一点都没有。

jennyshy

回复 10# huangfei2010
5 D* p- b4 O6 }5 |$ y* B/ ^6 o
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    是可以分清楚间脑一些东西的，16d的海马都可以看清楚的。我用14d的，只取了大脑皮层，中间的一些东西都去掉了。" v, S: I  Z6 a- T* s: K
胎鼠脑比较软，解剖时要耐心，慢慢来，否则就一片模糊了……

jennyshy

回复 10# huangfei2010 - K- _4 e$ ], P6 W" K

+ U/ k' ^. T& f
7 F9 F9 E) S. x8 w& t3 A) ^    16d的大鼠胎脑的海马是可以看到的，也可以分离出来，我用肉眼分的，其他的部分我就看不很清楚，但是海马是可以看到的，而且小心取也能分得很完整。14、15d的胎脑，去掉间脑等等，把皮层留下就可以了，呵呵宁缺勿滥，
- c" b, R# i: I, y* [+ l也有文献说把整个脑扔进去养NSCs的，不过只取14d胎鼠的皮层养，个人认为中脑内一些神经元会混入到你养的细胞里。