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求助,原代神经干细胞的具体步骤。 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-7-20 10:18 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
各位仁兄,我最近在做神经干细胞的原代取材。不知是取材步骤的问题还是所用动物为幼年大鼠不是胎鼠的问题,总之所取的效果不满意。而且里面的杂质非常多,一天不换液就很浑浊。所以想求助各位,有谁取原代神经干细胞成功的话,能不能将您的实验步骤(具体的)发上来看看,也供大家学习学习。因为神经干细胞是所有细胞中比较难养的细胞之一,所以包括换液什么的总是感觉很头疼,例如:大家是不是都离心后换液呢?传代时是直接取半量的培养基还是离心后重新换培养基?。再就是大家传代是物理吹打还是胰酶消化?等等,我感觉有很多问题还不是很清楚,所以想请教各位,尤其是已经成功培养神经干细胞的同仁们。谢谢!
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沙发
发表于 2010-7-20 22:08 |显示全部帖子
回复 2# rhmm 3 p6 @8 q: e& {" }- C" s
谢谢了。

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藤椅
发表于 2010-7-21 19:03 |显示全部帖子
怎么没人发取原代的方法呢?是不是都是买的细胞啊?

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板凳
发表于 2010-7-21 19:03 |显示全部帖子
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怎么没人发取原代的方法呢?是不是都是买的细胞啊?

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报纸
发表于 2010-7-26 18:23 |显示全部帖子
回复 6# jennyshy
* l8 q( K/ w1 R8 \! `谢谢指点。我取神经干细胞时就是按照一些论文上的方法取的,但是效果不好。而且至今我都不知道怎么除去里面的杂质,主要是小血管和组织片,因为神经干细胞球和杂质都是悬浮的。请问你们取得时候有杂质吗?又是怎么去除的呢?
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地板
发表于 2010-7-27 21:05 |显示全部帖子
回复 8# jennyshy 3 @0 s4 T2 m2 Q) U( N4 D
看来我得改进我的方法了,继续努力了,呵呵。

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包包
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发表于 2010-7-29 08:43 |显示全部帖子
回复 10# huangfei2010 [/b了。看文献上胎鼠多是在解剖显微镜下取组织,不用显微镜的话估计就很难分出是那一部分
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发表于 2010-7-30 08:26 |显示全部帖子
回复 12# SVZ
+ v4 F6 D- R# t- T* |. C现在知道为什么半量换液了,原以为是怕细胞环境改变太快,适应不了呢。谢谢了。
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