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[请教] u6启动子的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-15 11:24 |显示全部帖子
你好,我想用pll3.7做shRNA,也是卡在如何确定U6启动子转录起点的问题上,不知到底需不需要在意这个问题,请赐教。
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沙发
发表于 2011-8-16 12:23 |显示全部帖子
本帖最后由 runsong 于 2011-8-16 12:26 编辑
# p1 Z1 R2 [) `/ J3 P" X- _% q0 Y
+ D& k, i; C6 D$ D+ K回复 hughliang 的帖子" b. D/ a9 `0 y  J. H) a7 U6 h

% r: q" c, i7 }! O5 |( b十分感谢,你提供的线索太有价值了。
* C1 l2 C- [# C: O即pll3.7中
. B# i; f. E  d* dAn HpaI site leaves a blunt end prior to the –1 position in the promoter. The oligo design must incorporate a 5’ T in order to reconstitute the –1 nucleotide of U6.- \8 j# M0 w2 m3 l0 L2 ~" c
引物设计应为 Sense oligo: 5’T-(GN18)-(TTCAAGAGA)-(81NC)-TTTTTTC- g( U& W! {( \, H& {2 H% F
而且这个方法与一篇中文文章的做法一样。; P7 x6 ~( I. h. _8 }
《Cdx2基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定》(钱倩)

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Cdx2基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

pll37cloning.pdf

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Lentiviral RNAi Protocols - Cloning

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