u6启动子的问题

fguw

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- V' L& M! X; \1 A- p; v$ Q6 [7 n$ y) G' r8 r& M
可能是长时间后慢病毒失活了，所以，不再有KD，
- l; m" o! ]- |. ^) @  U没有实验结果验证，猜的
' R8 u* g# [7 c" ^$ _作普通转基因有类似问题，
0 Q& U; [/ u1 l3 K# T! Y/ m3 S- x- H有问题，欢迎探讨

fguw

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* r7 i4 ]4 ?- f! e7 t* E4 i' Y' W6 g
我觉得你做试验的细胞是多克隆？没有挑单克隆？
( B* ?: k4 v# }4 S; ]流式证实转染细胞仍有荧光，大概阳性细胞比例多少？
" g7 M% x, C$ V' y4 l如果比例比较低，可能WB检测时更多的是非阳性细胞细胞（失活）信号。所以KD效果不好。
) Z( d# Y3 \& n2 i; ]7 e$ U& d还有，SHRNA 和GFP使用不同的PROMTOERS，可能在不同的LOCUS活性不一样，当然，我不太认同该观点。