我养的大鼠骨髓间充质干细胞的图片，是老化了吗

wsrz

养了两个月的干细胞，大鼠、小鼠都养过，全骨髓法培养，但是结果不好，细胞不是死了就是老化了，老化是师姐说的，我自己不清楚这是否算老化。之前有个TX发过帖子，他的细胞跟我的很相似，很多TX回帖说是老化。我也把我的图片传上来，大家来看看。

hhxxattxs123

请问不老化的骨髓间充质干细胞应该是什么样子的呢？梭形的吗？

如来的观音

franklinhg 发表于 2010-7-26 14:42 - ?3 |- U: y/ v- w: n
已经老化了  8 n9 G1 ~( B, k1 H
建议 接种密度适度提高  两只大鼠分离的细胞接种一个T75的培养瓶子

) Z  c" q1 C6 g% E3 h7 W
培养原代大鼠MSC时，您说两只老鼠来源的细胞接种同一个T75？是双侧后肢胫骨股骨吗（意思说2对双侧胫骨股骨共8条骨头的量）？不同老鼠之间的MSC培养在一个瓶子里，不会产生类似于不同血型间的溶血反应吗？

mojai

传代时细胞数量只是一个参考面，还应看下细胞是否够纯！细胞增殖活力如何！
" m8 @& u) S& @一般原代细胞传代时有一个很长的细胞适应期，需要比平时传代稍高的细胞数量，过了P1代，再往下传，风险会相对少一些

wsrz

细胞没长满 提前传代有用吗 可以用吗 长80%-90%传代比较好  ?2 R+ i! {' S" F* x& R% Q
大海 发表于 2010-7-27 11:02

0 J% K, i# H) L2 B7 R& u4 E( e  m4 r5 ]/ C6 `4 q" G
. v" `. c' X9 P+ Z) ^
    这个问题提得挺好，BMSC呈集落样生长，一团一团或一片一片地分布，而不是像其他细胞均匀平铺在瓶底，我一般养到5-7天，这种分布就很明显了，而且每一团都有很多细胞，我想如果是均匀平铺开来，应该能占瓶底的80%了，所以我就传代了，传代时感觉细胞并不好消化，离心后的细胞也不多，我按照1:2传代，今天去看了细胞，状态还不错

wsrz

回复  wsrz " M0 I% I2 v# i5 |

9 ?+ D" u+ Q( U8 i; ?* R
% N/ p9 O4 a+ k4 |4 ^   估计很难消化的就是成纤维细胞，我也遇到类似的情况，你可以把消化下来的收集起来，或 ...2 L! |3 h: j$ r( C
小熊不杀生 发表于 2010-7-29 15:10

! ]. e3 G! c6 d
4 z/ G. P4 G2 P. q) d' w  N- B) m6 N9 {7 E
    我把消化下来的传代了，今天去看了细胞，没想到细胞形态、数量都还不错，如果能传第二代，到时把图片上上来

wsrz

1 D1 f- z8 A! u

MSC传代多了，也会老化比，如到P6代就会出现老化，成纤维细胞就会多些，细胞量会下降很快。二到三代做实验最 ...4 P. b% I+ e- \/ p0 d
chendongbo338 发表于 2010-7-29 14:19

) [# w5 B0 x8 y) D+ I' t- B' Z+ C! V/ w; q9 I# n2 k
BMSC第一次传代不是7-10天左右吗，我看过的文献有这么讲的，所以我养到了七天，如果状态好我就会开始传代。今天去看了一下传了第一代后的细胞，没想到状态还不错，形状、数量都比没传代前好。我就是准备用二到三代的细胞做下一步的实验，这两代的细胞活力最好。

zx19851985

我有试过BMSC在贴壁率90~100%后再接着养2天，就成为这种形态，老化的表现，所以也有可能是细胞密度太大所致的吧。还是要看你这7天的细胞变化确定了

小熊不杀生

回复 16# wsrz   r4 d+ U2 `3 U7 `7 h: L

* p$ V- r, H: c2 B' v1 U6 o: a" {; d' _. g2 ~+ O: l2 R
   估计很难消化的就是成纤维细胞，我也遇到类似的情况，你可以把消化下来的收集起来，或者冻存，以备将来鉴定的时候用

chendongbo338

MSC传代多了，也会老化比，如到P6代就会出现老化，成纤维细胞就会多些，细胞量会下降很快。二到三代做实验最好，不知你为什么要养到七天