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请问有没有用磷酸钙共沉淀进行慢病毒包装 请教大家   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-7-29 13:57 |显示全部帖子
你好,我做过用氯化钙转染293T细胞包装假病毒,当加入2X HBS时,要确保混匀,室温静置4-5min,然后滴加如刚从培养箱中取出的293T细胞皿中(转染前换液,培养一段时间,确保培养液是温的,或者将培养液在37℃预热,转染前更换),轻轻混匀,显微镜下观察细胞培养液中悬浮着一些细小的颗粒,培养12 小时后要记得换液。
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沙发
发表于 2010-7-31 17:06 |显示全部帖子
回复 3# lpzhdm
* |! Z6 ^; x7 B" f2 s& i* D* E8 _) G9 b2 S

; m9 L2 n& U  z/ d4 l9 O2 |( _    很有可能,你不妨可以尝试下转染后12h换液,看下转染效率有没提高。另外形成颗粒的大小对转染效率也有直接的影响,要充分混匀,静置的时间也得把握好,长了颗粒会变得很大,效率会很低的。祝你实验成功
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