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[讨论] 分离单核细胞出现问题,有图,求真相! [复制链接]

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楼主
发表于 2010-8-5 16:41 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 realinter 于 2010-8-5 16:43 编辑 2 ?2 |9 K8 O; Q. E

' E& e+ C/ S2 g; _. j外周血分离单核细胞,/ F6 p7 b: D+ S. Z
刚刚买的GE的Ficoll-Paque PREMIUM
% ?  f3 L  C. Y5 R% B% V但是离心后出在Ficoll-Paque 层出现白色的沉淀,求原因8 |# Q7 M- W% g% I* [
是不是加大离心时间和离心速度就会有帮助啊

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沙发
发表于 2010-8-5 22:45 |只看该作者
第一,刚开始加稀释的外周血时候要慢一点,尽量保持界面清晰;7 R' W7 v) c0 |' A/ @" e! y
第二,控制好离心的速度和时间,偶一般用3000 rpm离心30 min。
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藤椅
发表于 2010-8-5 22:55 |只看该作者
那一層是幹細胞>

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板凳
发表于 2010-8-12 09:26 |只看该作者
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准备实验一下加大离心速度和时间看看。

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报纸
发表于 2010-8-12 10:35 |只看该作者
稀释时,操作时间有点长。
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地板
发表于 2010-8-12 17:15 |只看该作者
回复 5# exin11 - [- T, V0 g" }  l& l- t
没有稀释哦,准备稀释一下试试

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发表于 2010-8-12 18:18 |只看该作者
我们实验室 前期分离过几次都没有出现你所说的现象。估计和你的离心力和时间有关!你自己在摸索下条件
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发表于 2010-8-12 19:42 |只看该作者
回复 6# realinter ; Z* s& \' c' }% @* N- S$ A3 x
: o2 k* v. K/ Y# J, i

; `" j2 Q" C. @4 u5 F1 }' e0 P    哦,我做的稀释了。效果还可以

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发表于 2010-8-13 10:59 |只看该作者
离心的时候不要刹车,将加速度调为零。
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发表于 2010-8-13 10:59 |只看该作者
离心的时候不要刹车,将加速度调为零。
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