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[求助]小鼠胚胎干细胞核型图,大家帮我看看!   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-8-10 02:16 |显示全部帖子
一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目,小鼠是40条,大鼠是42条。. {7 C. \9 [  f, H: l( ~
最好能多计数一些完整的分裂相。
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沙发
发表于 2010-8-10 02:19 |显示全部帖子
我觉还有一个问题是trypsin的处理时间,es细胞是成团生长,dissociate的不充分也不好,我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟,充分dissociate ES细胞后,然后低渗20分钟 at RT.  K0 z. M3 t9 O0 h
细胞的浓度也不要太大。
; j% L- T( `% ?6 l4 B( c7 D我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。- n* Q% f* p! R
我都是用叫10ul直接到slide上,也不错。
) T/ H+ H/ n( v1 B' ^还有,我从来都没有看到过publication说低渗1小时,我觉得太多了。
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藤椅
发表于 2010-8-14 22:48 |显示全部帖子
回复 11# liulilin - ^- u! _9 A( R9 g, f# y/ S3 A

$ F8 h1 t; ?4 o. s/ X2 R. Olz,这个是一个G带的结果。2 |" h- Y% R' f9 w4 w1 B
对于一般的ES细胞的检测,只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。
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板凳
发表于 2010-8-14 22:49 |显示全部帖子
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回复 12# hcluo
) h& z! Z" t, f( z
: v0 ~/ {7 u" C  L$ N/ \9 X
5 P' ~0 M3 D9 V8 t- Q! a  看起来很像是一个雄性的。
' V- ?1 r; ]/ ?6 u* U/ W好像有一个Y。
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