[求助]小鼠胚胎干细胞核型图，大家帮我看看！

iseeyou1210

一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目，小鼠是40条，大鼠是42条。
; J  i- f1 k% X$ \2 s9 @0 P6 T最好能多计数一些完整的分裂相。

iseeyou1210

我觉还有一个问题是trypsin的处理时间，es细胞是成团生长，dissociate的不充分也不好，我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟，充分dissociate ES细胞后，然后低渗20分钟 at RT.
6 Q  e, ~; B  l# v& |. J0 |细胞的浓度也不要太大。2 [% F) \7 _) h& Q! P
我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。5 a4 |! Y* Q- O# x! L
我都是用叫10ul直接到slide上，也不错。& i$ H' F7 S& \9 X$ Y
还有，我从来都没有看到过publication说低渗1小时，我觉得太多了。

iseeyou1210

回复 11# liulilin
# y5 S" L' G% y* T, o- A$ R
5 t# q/ f* s: R$ q& C# Flz，这个是一个G带的结果。4 H8 X* z. I! [- J, O8 f) K
对于一般的ES细胞的检测，只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。

iseeyou1210

回复 12# hcluo
% B: `; D' k* n' w2 T* B- A* j( S* a3 n) |% m4 C4 e

% ~* y- [* |" i8 V# @; Z3 `0 B  看起来很像是一个雄性的。
9 P9 n1 t% x9 j0 N- n4 A好像有一个Y。