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[求助]小鼠胚胎干细胞核型图,大家帮我看看!   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-8-10 02:16 |显示全部帖子
一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目,小鼠是40条,大鼠是42条。9 q$ G% S" q) z9 i" {; n
最好能多计数一些完整的分裂相。
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沙发
发表于 2010-8-10 02:19 |显示全部帖子
我觉还有一个问题是trypsin的处理时间,es细胞是成团生长,dissociate的不充分也不好,我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟,充分dissociate ES细胞后,然后低渗20分钟 at RT.
- C1 W: J. c, |) N: E6 V) x* H细胞的浓度也不要太大。, `* n$ s9 f* e" _
我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。
% {: V0 H7 G8 W# n& y( N我都是用叫10ul直接到slide上,也不错。
, w" K0 Z7 d$ U" n2 E  D1 v还有,我从来都没有看到过publication说低渗1小时,我觉得太多了。
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藤椅
发表于 2010-8-14 22:48 |显示全部帖子
回复 11# liulilin
2 _, S. m2 P4 j& U- L
+ }2 F7 ?2 Y5 I/ d7 f% Llz,这个是一个G带的结果。
5 h1 {+ N% S" `( q1 S) P0 B! ]对于一般的ES细胞的检测,只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。
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板凳
发表于 2010-8-14 22:49 |显示全部帖子
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回复 12# hcluo - i6 C; R5 B% V
1 K$ e% J, O, _- w; b# C

* A# Q. G- g" }) ~: o( J$ \3 s6 P& |  看起来很像是一个雄性的。1 [! x' V# z, D* o5 `# [9 w; {
好像有一个Y。
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