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[求助]小鼠胚胎干细胞核型图,大家帮我看看!   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-8-10 02:16 |显示全部帖子
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一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目,小鼠是40条,大鼠是42条。
% D! o9 p( _& {) g/ b; [最好能多计数一些完整的分裂相。
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沙发
发表于 2010-8-10 02:19 |显示全部帖子
我觉还有一个问题是trypsin的处理时间,es细胞是成团生长,dissociate的不充分也不好,我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟,充分dissociate ES细胞后,然后低渗20分钟 at RT.
* E$ V) q! }) M% T. S细胞的浓度也不要太大。
" ]4 @) v) L2 m4 }. x& Z我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。- G5 X! \& v# R; u& z/ Y
我都是用叫10ul直接到slide上,也不错。
+ d8 {. b- Q% ~6 I3 a. \还有,我从来都没有看到过publication说低渗1小时,我觉得太多了。
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藤椅
发表于 2010-8-14 22:48 |显示全部帖子
回复 11# liulilin + t/ I: P+ k3 x  K# y: n4 X
0 K$ x  I% K0 \8 a6 g
lz,这个是一个G带的结果。3 u7 e' Y: x4 l
对于一般的ES细胞的检测,只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。
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板凳
发表于 2010-8-14 22:49 |显示全部帖子
回复 12# hcluo 0 u* N( F7 a: X2 E' R6 K/ {3 d1 }

8 V; D$ A( m8 m. E
# D( |) Z  A' v- E  看起来很像是一个雄性的。) Z- q+ I" r0 L$ h8 X: C# j
好像有一个Y。
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