奇怪，神经干细胞消化后传代后细胞都消失了？（附图）

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我做神经干细胞离心用的是1000rpm，3min，我把上清吸出拿到显微镜下看过，基本没什么细胞了。另外我使用的消化+机械吹打的方法。用invitrogen公司新上市的TrypLE消化液（说是胰酶替代液，作用较为温和些），消化5-10min，先在胰酶中将神经球基本吹打开后，再加入3倍TrypLE量的DMEM/12稀释，进一步吹打，约15-20次，不用加终止消化液（TrypLE说明书上说可以不加），离心，1000rpm，3min，培养液重悬细胞即可。" m' E2 o) v+ X% z0 }9 p
我养的细胞没有出现过你说的情况，但基本上是传到第3代就开始有一些神经球容易贴壁分化了。