急！求助脂肪间充质干细胞培养问题

susannajoke

最近做的成年大鼠脂肪间充质干细胞培养，一直因为细胞状态而苦恼。, h5 @3 F, ~7 s6 n& |
细胞取材后经历了一段时间，细胞不贴壁生长，跟换了三种培养基，最好换成DMEM终于能培养出；
# E. `/ }" _+ O8 N/ `但是有时候传代后细胞又出现不贴壁，或者贴壁后发生死亡的现象，初步判定是培养基的问题；今天用试纸测了PH，快到8了，偏碱；7 t1 R5 t* p8 g6 C7 g7 x4 w& x- E$ W
9 C- P+ f! t5 q3 _" D
请问培养脂肪干细胞的高手：
2 g9 o' h! P% d0 K/ G1 ]% x' }$ }培养基酸碱度这个问题大么？如果出现这种问题怎么处理？正常培养脂肪干细胞应该为多少酸碱度？
6 m1 K) Y; f! O/ w- T" x我们用的培养基一般能用1-2月，这个时期对培养基影响大么？如果这样，我需要补充什么？
8 j  N" O  h0 T$ S  ~如果不考虑培养基，细胞传代酶解是否对细胞活性有影响？安全的酶浓度？
, N* U: T0 Z8 c( H' Y5 |$ G
0 V# B$ d* a% X9 g5 w9 c- E( N$ l十分感谢！

susannajoke

回复 2# jqm12345 ) ^- V, A& W$ y- [
  g/ T" q) t' Y0 t$ C3 ~0 D

0 @& h6 g6 F/ D  D8 E# P0 j    一直用的低糖DMEM

jqm12345

你用的是高糖还低糖的DMEM？