急！求助脂肪间充质干细胞培养问题

susannajoke

最近做的成年大鼠脂肪间充质干细胞培养，一直因为细胞状态而苦恼。
. z' c! K3 X7 Q5 h细胞取材后经历了一段时间，细胞不贴壁生长，跟换了三种培养基，最好换成DMEM终于能培养出；
1 K% A# r3 b( f, S* u6 E但是有时候传代后细胞又出现不贴壁，或者贴壁后发生死亡的现象，初步判定是培养基的问题；今天用试纸测了PH，快到8了，偏碱；
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请问培养脂肪干细胞的高手：/ x1 M- b! p3 E  q. [
培养基酸碱度这个问题大么？如果出现这种问题怎么处理？正常培养脂肪干细胞应该为多少酸碱度？
+ W0 t" n# t* g% T3 i/ g我们用的培养基一般能用1-2月，这个时期对培养基影响大么？如果这样，我需要补充什么？) H$ y" t" h  c$ O
如果不考虑培养基，细胞传代酶解是否对细胞活性有影响？安全的酶浓度？9 w4 q4 ?" J' n$ E
( ]$ _3 L" C3 p  U8 _
十分感谢！

jqm12345

你用的是高糖还低糖的DMEM？

susannajoke

回复 2# jqm12345
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7 L! L+ X" i9 ?9 \# Y    一直用的低糖DMEM