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[请教] 急!求助脂肪间充质干细胞培养问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-8-16 01:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近做的成年大鼠脂肪间充质干细胞培养,一直因为细胞状态而苦恼。! h4 i8 ?& c: t2 O
细胞取材后经历了一段时间,细胞不贴壁生长,跟换了三种培养基,最好换成DMEM终于能培养出;3 {5 G. ~8 [+ g/ X9 }/ k1 V7 U
但是有时候传代后细胞又出现不贴壁,或者贴壁后发生死亡的现象,初步判定是培养基的问题;今天用试纸测了PH,快到8了,偏碱;# k) B4 T8 S, p8 g8 N' }) t- N

) L" `0 F( s0 S" j请问培养脂肪干细胞的高手:
3 i( j: K1 o3 u( \培养基酸碱度这个问题大么?如果出现这种问题怎么处理?正常培养脂肪干细胞应该为多少酸碱度?
, A) Z3 B) C* a$ U我们用的培养基一般能用1-2月,这个时期对培养基影响大么?如果这样,我需要补充什么?
( n. [+ i: M- C" H如果不考虑培养基,细胞传代酶解是否对细胞活性有影响?安全的酶浓度?/ \. @, t2 H7 p) v6 f
1 |1 m9 ^5 ^% \& y" C7 m
十分感谢!
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沙发
发表于 2010-8-17 15:14 |只看该作者
你用的是高糖还低糖的DMEM?

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藤椅
发表于 2010-8-17 17:23 |只看该作者
回复 2# jqm12345
( N# m( t; u% n4 v! ]- {- K9 V+ @  c
2 G5 \) w! s, P
    一直用的低糖DMEM
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