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[讨论] 都说无菌操作要这严格那规范——大家不妨晒晒自己的豪放操作吧!也给新手们打打气   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-9-6 21:38 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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本帖最后由 deron 于 2010-9-6 22:01 编辑 2 r5 o+ Y0 \3 D! O4 V1 u7 K

- }0 l/ v" L! i半年多细胞养下来,我们一致认为养女人比养细胞简单多了,起码她们不会动不动就死给你看。。。
2 @% V$ m, g8 ]* I$ I, W; I7 Z开个玩笑,都说万事开头难,不过跟细胞混熟彼此了解以后,就可以很随意了。
/ }4 d! L) b' \: }, Y1 G3 G$ Z1.进出实验室一套白大褂不带换的,经常出去买个饭,回来接着进无菌室。
1 ^* L1 C# Q2 T$ V' v7 y4 m2.不戴手套,喷点75%的酒精就上台了。! E: F: Y' I1 k
3.师妹一次换液烧瓶口的时候突然酒精灯蹿火了,她下意识往瓶口那儿一吹,火焰立下就灭了……不过后来细胞也没事儿(特技效果慎勿模仿)
5 B+ A$ d: M" |, U4.冻存细胞不经程控降温直接从4度扔进-80冰箱/ z. P2 S0 R9 s# l7 w
5.帽子口罩爱戴不戴
. W& d  y+ I- f. T0 j6.兴起时穿着休闲的衣服,进无菌室往手上喷点酒精,打开培养箱,捏着瓶口就上显微镜观察/ ^2 L  `+ W- A6 z1 [* N- U5 Z" t+ X
7.胰酶血清直接扔进40度水浴化着,有时候化开好一会儿了才记起来。. U, l, C( O( O7 Y& ~
8.培养基和缓冲盐溶液直接扔到台子上照紫外。5 Y' b5 O8 a) B( H' ^3 T: ?
9.急用器械又来不及灭菌的时候,拿个小铁碗倒点酒精进去,扔进器械点上火烧一小会儿就行。
0 R, R* V' N. Z/ q9 g10.组织块“吧唧”掉台子上了,夹起来用缓冲液冲冲接着用。
' y+ Y' j8 g# @" C2 [6 v( r11.有一阵子酒精灯坏了,就只开着风机“裸”操作,居然没有问题。: f# |; S6 f/ r+ `7 v
得到的几个结论——帽子口罩手套白大褂不是保护细胞是保护自己用的;无菌室无菌台本身的洁净远比几个酒精灯火焰来得实在;很多东西你晓得成分原理之后自然能够游刃有余天不怕地不怕了。
6 J6 ?1 U, o! e' F也惨过,右手有三四个月一直处于无毛的荒芜状态,细胞有两个月就是不给你好形态看,有一次给所有细胞换液时搞错了培养基结果差点一个月心血全流掉~~~2 O7 ~/ j3 E5 F8 A8 @0 F
话说实验室一大姐大级别的人物第一次给96孔板换液的时候把板子从超净台里拿出来,华丽丽的往垃圾桶里一甩,接着又一甩……结果染菌了
( q# v# C0 g7 k4 b" k* ?2 r0 G$ k5 K: y& V, m
也不能毫无章法,个人以为三个必须的原则:
5 x0 [( V# V  v& H4 |! I- M$ M1.操作必须保证在超净台深处,移液管等与细胞直接接触的物品一定要悬空不可与台面接触。
. W$ R* k" H+ v2 W. F. y2.实验前的30min紫外消毒很有必要。' ^. t7 y" u4 z: U. v
3.操作结束后彻底清理实验垃圾。
, Z- I' E: O- q7 b; I4.培养箱定期消毒(最好有一个记录本),无菌室定期清扫(除尘)。
( ?+ Q4 x% b/ _
$ ]" N/ K: g5 H, u8 j私底下还是很得意自己的细胞操作技术,染菌率在1%以下
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15楼
发表于 2010-10-22 17:10 |只看该作者
回复 14# bridgeyangfan
5 ^8 @- Z3 I% U1 h- P" l, A1 {
; }; f7 K7 T: V0 h, B* d6 x' Y0 R
    不得不说,仁兄的话醍醐灌顶。
1 _  j9 K6 W9 U- X7 h0 S我们的细胞室不含传染源类物质,所以才会显得随便一些;在做蛋白试验的时候,类似的问题我们都很注意。# S4 o" G/ z! X" W8 A0 u3 k
无论如何,多谢提醒

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14楼
发表于 2010-10-21 20:10 |只看该作者
以前做克隆习惯做实验严谨,最近转做细胞培养,以前听说细胞难养,现在养了一段时间,没有出现养老、其它细菌感染的现象,感觉做“科学”还是严谨要好,几年前某省省城出现SARS病例,就是几个研究生不按操作规程带出实验室,最后还把病毒感染给她母亲,致使其母撒手而去……
1 d1 H# L2 L# N& t$ A一句话:做学问要有做学问的“道”,新手上来,不知深浅,语有不妥之处,敬请谅解。
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13楼
发表于 2010-10-21 18:52 |只看该作者
2 , 6 经常干

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12楼
发表于 2010-9-29 21:36 |只看该作者
有一次一博士传细胞,离心完毕,倒掉上清时一不注意细胞团掉到超净台面上,急忙用枪头挑回离心管,洗了几次接着养,居然没有污染!超净台真的很干净!
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11楼
发表于 2010-9-29 15:21 |只看该作者
我最郁闷,每次都是很小心的操作,却老是污染,搞的我实验都无法进行,正在极度郁闷中!

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10楼
发表于 2010-9-21 11:57 |只看该作者
不敢豪放,不豪放都出错。

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金话筒 优秀会员

9楼
发表于 2010-9-19 22:34 |只看该作者
呵呵,很佩服那位大姐大级别的我也想试试。我最搞笑的一次是,dish被contamination了居然不知道(因为细胞还好好的),还给老师欣赏了下我的大个iPS,后来被老师嘲笑那是霉菌感染,结果全incubator大检查,霉菌一大堆,真个incubator都out了……
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发表于 2010-9-19 19:02 |只看该作者
这也要鼓励嘛?

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7楼
发表于 2010-9-10 13:40 |只看该作者
12567经常的,现在还是穿大褂操作了毕竟还是要保护好自己
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