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作者：刘俊玲 李春玲 d# W" z! t# p* a) {& x
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【关键词】脐血干细胞移植- Y: k4 H% h' X! ?6 d
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目前造血干细胞移植的供源主要包括骨髓、外周血和脐血三种，在我国，脐血移植作为外周血干细胞移植的一种补充替代方法已日益受到重视。( F2 b7 W6 W+ q h; V, M
1 脐血造血细胞的生物学特性 人的造血干细胞主要存在于CD 34 细胞群中。在体外长期培养时发现脐血具有以下特征:（1）脐血中CD 34 CD 38 - 细胞形成集落的频率及其所含细胞数均比骨髓高，形成集落的时间较快，对集落生长刺激因子具有更高的敏感性。（2）脐血中CD 38 - 细胞亚群产生早期不同细胞集落形成单位的能力较骨髓强。（3）在生长基质上进行体外长期培养时发现脐血单个细胞维持造血的时间更长。（4）在长期培养体系中，脐血中的CFU-GM能维持的时间比骨髓更长。（5）脐血能分泌某些生长因子，细胞生长周期速度更快，与骨髓或外周血中的同类细胞比具有一定的增生优势。（6）脐血细胞的端粒子更长，其移植存活期比骨髓更长、更稳定。（7）每100ml脐带血含有核细胞和祖细胞等同于1000ml骨髓所含有的细胞数。所以单一单位的脐血干细胞能重心组建的造血系统。这些试验结果说明，与骨髓相比，脐血中不但造血干/祖细胞数量丰富，而且细胞更幼稚，自我更新能力、扩增潜力更强。因而脐血可以作为骨髓干细胞的替代品用于治疗各种血液疾病。 脐血中的淋巴细胞还具有以下特征:（1）脐血淋巴细胞绝对数比成人外周血高2～3倍，但其表型及免疫功能均不成熟。CD 3 细胞数低于成人，且具有异质性。抑制活性占优势，产生细胞因子较少。（2）HLA-DR表达明显低于成人，Ⅰ类抗原表达也不足。（3）脐血缺乏致敏T细胞，对HLA不合抗原易产生耐受。而成人T细胞的细胞毒活性随抗原刺激的次数增多而逐渐增高。B淋巴细胞百分率高于成人，其分化成浆细胞的能力较差。（4）脐血中含有NK和LAK细胞作用的细胞。鉴于以上淋巴细胞免疫不成熟的特点，可以推测脐血移植与骨髓移植后相比，移植物抗宿主病（GVHD）和宿主抗移植物反应（HVGR）的发生率低，程度轻。% B6 { ~: s9 y4 C( j+ ]- Q
2 脐血的采集与保存 目前采集脐血常用方法可以分三种（1）血瓶滴入法:将胎盘放置在容器内直接采集脐血。（2）动脉采血洗涤法:用一次性注射器插入脐静脉采集脐血。（3）动脉灌流静脉采血法:用特制的采血器在完全密闭的条件下采集脐血。不论采用何种方法采集脐血，在保存前均需要进行细菌污染检查、血型及血清学病毒检查（艾滋病病毒、巨细胞病毒、肝炎病毒、梅毒螺旋体、弓形体病毒）以及HLA分型，只有在各项检查中合格的脐血，才会被分型冰冻保存，以供将来移植应用。采用后的脐血可在4℃或室温下保存3天，超过3天，脐血中的造血细胞活力即明显下降。放置在液态氮中冰冻-80℃可达到长期保存的目的。目前常用的分离保存方法有密度梯度离心法、羟乙基淀粉（HES）分离法、明胶分离法、二步离心分离法等。实践发现HES分离法操作最简单，这两种方法可应用于大规模处理脐血。保存的效果主要与冻融过程密切相关，而与冻存时间关系不大，可以预测干细胞悬液可能有效冻存10年以上。
W, x; A$ o/ v7 M; h# J3 i 3 脐血移植临床应用 脐血移植与骨髓移植一样，都是造血干细胞移植，因此，从理论上讲，它与骨髓移植的适应证一样。在当前供体严重缺乏，骨髓移植举步维艰的状况下，脐血作为一种取之不尽的供源，已引起越来越多的关注。 4 脐血移植中存在的问题及可行的解决方法 近几年来，随着对脐血的认识和基础与临床研究的不断深入，人们对脐血的应用前景有了更为明确的认识，但同时也给研究人员提出了一些待阐明的问题。 脐血移植应用的局限性主要是因为脐血采集量有限，其中所含的核细胞数较少，不能满足成人患者移植所需。临床实践提示，移植成功所需的细胞数不低于1×10 7 /kg为了解决这个难题，研究人员从多个方面进行研究，提出两个建议性方案:（1）混合脐血移植。动物实验已取得成功，但应用临床尚存在一些问题，需进一步研究和解决。（2）扩增脐血移植。有研究人员发现干细胞在体外具有增殖能力， 但体外培养扩增细胞虽然能提供短期移植存活，可长期移植存活延伸能力被破坏。临床治疗方案也许需要移植两部分细胞，一部分体外培养扩增的脐血移植细胞提供迅速的短期移植存活，另一部分没有经过人工处理的脐血移植细胞提供长期移植存活所需的干细胞。 随着脐血库的建立，将来也许会出现一个患者在多个库里检索出合适的供体。如何选择最佳的移植方式，也许将是我们面临的又一个问题。 （收稿日期:2004-10-19） 7 T C) Z: w* H7 h
作者单位:136000吉林省四平市中心医院% C* U! s: K" |" D8 F9 I8 n5 U* t8 r
（编辑李 梁） |
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