慢病毒感染细胞后会不会随着传代而复制？

jiays

慢病毒感染目的细胞几小时后就死掉了，由于其嵌入宿主细胞基因组的能力非常强大，所以慢病毒感染后类似稳定转染，但如果你转染的基因是抑制增殖的，随着细胞传代的增加，转染阳性的细胞由于增殖能力低下会被增殖快的未转染细胞给稀释掉。所以在ips的诱导中，慢病毒质粒也标记了抗性基因G418，达到稳定转染的效果。
/ t0 O) y+ M$ b8 j& }3 S/ ^4 [注：慢病毒一般称为转导细胞，质粒脂质体为转染，上文中用转染系顺口言之，写文章时一定要写成转导。

jiays

我们一般不测定病毒滴度，直接用包被了病毒的293T细胞的上清液（过滤除菌后）加入到要转染的目的细胞培养基中（1：1----1：3），6h后换液，24h后观察目的细胞的GFP强度，达到90%以上，即认为病毒包被成功。

jiays

直接用293包被的病毒上清液体过滤后1：1或1：2加入完全培养基中，转导目的细胞，我用的是肝癌细胞，可以达到90%以上，看GFP，观测时间48h以后，如果你的效率不高，考虑是慢病毒包被出现了问题，
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