小鼠胚胎干细胞感觉很小是怎么回事啊，谢谢

xiaoserizi

最近从别的实验室借来了胚胎干细胞系，种在了自己做的feeder上，感觉形成的集落很小，培养了一段时间了都是这样，想做鉴定，但是定的akp没有到，问问各位战友，这是不是说干细胞分化了，还是状态不好，我是用海克隆的血清，需不需要用gibco的啊
+ `/ S4 d0 t4 y* {' ~，现在应该怎么办啊，因为我看到别人样es时，集落都很大，而且很多，两天就可以1：3传了，但是我的长的小也很忙，迷茫啊

细胞海洋

建议你上图

liweitiky

回复 1# xiaoserizi 上图看看，
' P9 S' d7 A# |* [2 J% k    俺的也是小鼠骨髓的，也很小。

qiuweiqin0618

应该是状态太差了，有可能是别人传了几代的

juan880929

我们血清都用Gibco的，你可以试一下。但是集落长不大应该是细胞状态不好，可以用20%的KOSR培养基试一下，有可能会逆转这种状态。但是低代次的细胞有可能会长得慢，你可以让他多长几天试一试。而且建议你从那要来的就问一下他们那的培养体系，换培养体系的话对细胞也会有影响

cony

我也觉得是培养液的问题，因为ES是从别人那拿的，拿回来后按照自己的培养液养，可能ES有点不太适应，建议你问下之前用的是什么培养液。海克隆的我用来养ES也不错，应该不是血清问题

dilal

我们养的也是小鼠ESC，细胞集落小可能的原因有：
+ ?4 b" h; G! u! |& q1、培养基血清浓度过低，你可以尝试增加血清浓度看看效果如何；
7 ?3 V, V& q: S6 b$ N2、培养基问题:可能选用的培养基不大适合小鼠ESC，我们采用的培养基是高糖DMEM+10%胎牛血清（gibco）+巯基乙醇+1%非必需氨基酸，你可以借鉴一下。- U7 P6 I) l% X- M, d3 O7 O, C7 |' z  W
不大像是细胞分化了，细胞分化并不影响其集落大小，集落常常呈现出分叉状，而且细胞核折光性较差。如果分化了，建议检查一下LIF的抑制分化效果。

xiaodiao123

为什么我培养胚胎干细胞不用血清呢，大家用血清的目的是干什么啊，贴壁培养吗

lhw7514093

楼上同志，培养动物细胞不用血清行吗？

lhw7514093

你没用血清也得用血清替代物吧，要不怎么行啊？