请教几个iPS细胞转染的问题！

zhaoyan1983

1.通常情况下病毒载体先转化到大肠杆菌感受态中进行扩增，之后用脂质体包裹转染到293FT细胞中，之后再转染如MEF细胞，请问为什么不直接转染MEF?293FT在转染过程中起着什么作用？为什么先要转到它的里面？6 f7 u+ B2 {7 _
2.病毒载体整合到受体细胞基因组时，是整个载体序列全部整合还是载体中的其中一部分序列整合？例如植物中就是农杆菌质粒中的左右T-边界之间整合到植物基因组中，而载体中的其余部分不整合，但不知病毒是如何整合的？还有是线性整合的吗？$ B% P4 E5 u$ h! q" |4 S9 i( C
3.Oct-4、klf4、c-myc、Sox2是利用一个载体转染的还是四个病毒载体分别转染的？是一个启动子还是四个启动子？
% L. [% G- o6 P4.对iPS传代后形成的iPS集落，可以说一个集落就是一个细胞系吗？

zhaoyan1983

回复 2# guosapphire
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% s/ \! K6 e) K3 ]请问293FT在转染过程中起着什么作用？为什么先要转到它的里面？

zhaoyan1983

它在大肠杆菌里不就可以大量制备了吗 那干嘛还要在293里再大量制备一次啊？请指教