请教iPS诱导过程中的问题（有图）

cicadacjk

我觉得问题基本可以圈定以下几个：4 t# @# D9 P$ s- O
1. 你的293或者MEF有支原体污染，feeder变差就是这个原因，支原体存在基本上是做不出iPS的，必须除去（这个应该是主要原因，其他两个是附加建议）
6 u6 B( @! D! |# r* R- @: g7 Z2. 你用的MEF代数太老了，一般三代以内，P2更好。
0 Y4 @6 b! O" d8 S! p3. PMX诱导，你附加了什么包装质粒，如果滴度高，六天四因子感染的MEF会长得满盘都是，所以包装质粒，转染技术可能都要提升。

cicadacjk

支原体极有可能在你的293T细胞上，这样你的病毒就带支原体2 L8 H1 O! j3 K1 J
带了Myc的细胞自然长势良好，只是你这个也不能算长势良好，只是能活能分裂罢了，要不然六天必然密到堆起来。如果有支原体是没有办法的，必须换细胞。不要幻想能除去支原体。
3 l0 l2 o* ]5 X* i1 t人的细胞代数大点没问题的，十代左右也就中等效率吧。MEF P4基本不行了。' r" G9 Y$ T0 ]+ D  Y  B3 j' g
你ES培养基是用FBS吧，没有用KSR吧？一般来说就是用15%的FBS养。, P* y4 n8 b% V4 T

. \% w: a* j+ d1 f! ^' o建议去找株干净的platE细胞，实在不行找一株干净的293，估计问题就能解决了。