请教iPS诱导过程中的问题（有图）

cicadacjk

我觉得问题基本可以圈定以下几个：
" J1 A5 n8 t+ x( s1. 你的293或者MEF有支原体污染，feeder变差就是这个原因，支原体存在基本上是做不出iPS的，必须除去（这个应该是主要原因，其他两个是附加建议）5 Y5 C% t, v6 f
2. 你用的MEF代数太老了，一般三代以内，P2更好。
: _2 i1 C- g! J5 e; }! d' h' L3. PMX诱导，你附加了什么包装质粒，如果滴度高，六天四因子感染的MEF会长得满盘都是，所以包装质粒，转染技术可能都要提升。

cicadacjk

支原体极有可能在你的293T细胞上，这样你的病毒就带支原体) \  d* Q; D8 f2 I0 \  f  V) L! A
带了Myc的细胞自然长势良好，只是你这个也不能算长势良好，只是能活能分裂罢了，要不然六天必然密到堆起来。如果有支原体是没有办法的，必须换细胞。不要幻想能除去支原体。8 a7 X9 {. a8 [
人的细胞代数大点没问题的，十代左右也就中等效率吧。MEF P4基本不行了。
: h, B: m5 r' J你ES培养基是用FBS吧，没有用KSR吧？一般来说就是用15%的FBS养。# k' H* ^+ p- ^: K* X; N
1 t4 j0 Z+ E) G$ x8 Y
建议去找株干净的platE细胞，实在不行找一株干净的293，估计问题就能解决了。