请教个爬片的低级问题

王乾

其实家细胞爬片不是为了节省抗体，而是为了把图片拍的更清楚质量更高而已。因为加了爬片，固定染色后就可以封到载玻片上了，这样就可以用显微镜或者共聚焦显微镜拍到高倍且高质量的图片，而在培养板里却很难拍到这样的图片。用爬片其实也不怎么麻烦，把爬片小心放入板空里面，用PBS洗个几遍，再照一到两个小时紫外就可以，当然有人推荐先用PBS洗，在高温灭菌，我的经验是再怎么洗一凉干总会有水渍，其次照一下紫外就可以达到灭菌的目的，我从来都没污染过。照完紫外，加上明胶或者多聚赖氨酸室温一到两小时，吸掉，PBS洗几遍，然后就可以传细胞了，由于是做细胞亚定位，所以细胞尽量传稀点，这样就可以保证一个视野下尽量有较少的不理想的细胞干扰，一般情况下24孔板的一个孔我铺3万左右的Hela细胞，效果很不错。