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查看: 172211\|回复: 3	go [请教] 酶切后电泳条带很淡怎么办？ [复制链接]

sidalin301

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楼主

发表于 2010-10-23 19:38 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印

酶切后电泳条带很淡怎么办？
20ul体系，2ul质粒，1.5%的琼脂糖胶，上样10ul，跑30分钟，结果显示条带很淡，怎么样才能使条带清晰？请有经验的大虾指点一下，多谢了！

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沙发

发表于 2010-10-23 20:31 |显示全部帖子

回复 2# 深海寂寞鱼 + L3 Y% b4 h+ _! k" g" t
0 k" {! @1 w# C1 s" d
: w/ y5 y7 W% k! T
多谢了，真是经验丰富啊，佩服，佩服！

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sidalin301

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藤椅

发表于 2010-11-24 10:45 |显示全部帖子

多谢各位热心人的帮助，我找到了问题的原因。
我以前以为酶切体系里面质粒的量不能超过体系的十分之一，后来发现自己弄错了，是限制酶的量不能超过体系的十分之一，这样的话可以在体系里面多加一些质粒，问题就迎刃而解了。; o5 S4 f& J& D+ l
不过还有一个问题请教各位，摇菌的时候能不能挑多个克隆？为什么要挑单克隆？反正质粒都不会发生突变的，大肠杆菌变不变无所谓吧？