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go

看看这是什么细胞,我要的是培养小鼠脂肪MSC   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-10-26 17:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 xiaona918 于 2010-10-26 17:03 编辑
, t3 _2 V, d" M  }1 X
% C. x: a# c8 l8 W' x; @( [3 O# E3 O我要培养的是小鼠的脂肪MSC,取的是小鼠的腹股沟皮下脂肪,胶原酶I消化2小时,37度,培养基是:F12+10%FBS(进口)+10ng/ml bFGF
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沙发
发表于 2010-10-26 18:35 |只看该作者
第二张图片很像我的那些老化的细胞,可以做下衰老染色。图二中的细胞容易消化下来吗?
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藤椅
发表于 2010-10-26 18:53 |只看该作者
回复 2# morning860
6 E+ @' g- Z4 E3 r* P& e- r" b( G  T3 w6 @' [/ e
" t1 w% M5 v' z) i) ]
   还没消化,正在养,反正几乎没有增值。不知道是什么细胞。

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板凳
发表于 2010-10-26 19:31 |只看该作者
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第一张从形态上看可能是内皮细胞,第2张细胞状态不好!另外,我认为胶原酶消化时间有点长,我们一般消化时间控制在1个小时以内(1g/L胶原酶)。
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报纸
发表于 2010-10-26 21:09 |只看该作者
回复 3# xiaona918 ( [3 m0 N' ?7 |* B8 F
  z. J6 e( n; q! V

( A4 S0 N" f( W, m7 Y- j" `    这是传代第几天的呢?接种时的密度是多少呢?

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地板
发表于 2010-10-26 21:41 |只看该作者
第二张图跟我的很像啊。感觉可能传代消化时间太长了吧。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-10-26 21:47 |只看该作者
你用的是不是母鼠?要是的话,那第一张那个圆的结构可能是乳腺细胞结构。另外,那个MSC感觉不太好,可能分化了。MSC到第五天基本就长满瓶子了。
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发表于 2010-10-27 09:24 |只看该作者
本帖最后由 deron 于 2010-10-27 09:32 编辑
* T$ ^: Q7 ?7 i( e1 L  b: h! v3 a. t* N
第一张是上皮型细胞,来源于外胚层和内胚层。
: m- g5 n$ M  S( U细胞特征为:扁平,细胞多角形,胞体中央有细胞核;细胞排列紧密,相互衔接或镶嵌;密度较高时,呈“铺路石”样,局部可形成单层的上皮样“膜片组织”。8 {, Z& e2 }# {0 s0 M4 {% x/ {5 U
很像吧~~~' R8 n8 E8 s9 g0 M. d- k" R8 g+ w4 e/ y
原代培养中经常会出现这类贴壁细胞,原代的内皮细胞还是比较泼辣。
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发表于 2010-10-27 20:57 |只看该作者
那种圆的细胞我也出现过两三次,做骨髓的MSC,感觉是取材的原因所致。而且那种细胞多了基本会越长越多,很难纯化掉。
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发表于 2010-10-27 21:11 |只看该作者
高手指点啊:谁有小鼠脂肪MSC的操作流程?用的血清是国产还是进口的?培养基是什么?
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