求助：有关肿瘤细胞的软琼脂克隆

qyguoguo

各位前辈:晚辈想做一下肿瘤细胞的软琼脂克隆，不知哪位前辈做过？司徒那本书上有步骤的简要介绍，请前辈指点一二：1.软琼脂克隆是否可用于肿瘤干细胞克隆能力的检测2.司徒要求培养基配置的温度设置都很严格，那细胞的培养一般都是在超净台里，恒温箱在外面，如何做到无菌避免污染3至于细胞按不同的细胞计数等级去接种，至于细胞的接种数不知前辈有何指教?请不吝赐教，谢谢

leisong12

软琼脂是判断肿瘤干细胞（分选后不同细胞）体外成瘤能力的常规实验。恒温箱里配好的胶是放在无菌密闭容器里的，临用时拿进超净台，迅速操作。细胞接种数要提前算好，分装好，用时加入胶里就好了。

qyguoguo

回复 2# leisong12
% W9 o0 b% S% t, I/ @6 Y% O
9 M" R7 T+ Z% V2 ^9 s5 {' O) [$ h1 o7 `& Y% \+ t! _
    谢谢前辈指点。。。

daviddow

1:能，你看看最近一篇结肠癌干细胞就是用这种方法。8 }7 n2 f6 f/ N5 E$ m
2：琼脂的温度不要从冰箱拿出后就做，室温放置，从冰箱直接拿出导致琼脂凝固。

qyguoguo

回复 4# daviddow 3 q5 h! c# Q' R) I$ g$ H
3 T! x5 U9 T  R& s6 P

, N0 J0 T, e5 H+ E/ r, ]  Y    前辈  结肠干细胞的文献能否告知文献名称或传一下全文，谢谢。。。

chuanbaozang

我也想看看那篇文献，大虾给传一份吧

chuanbaozang

我也想看看那篇文献，大虾给传一份吧

饶冠华

给你们传个protocol吧  一定注意预热琼脂和培养基的时候不要让温度超过42度  否则细胞会被烫死。

daviddow

通过克隆形成试验分析结肠癌干细胞的文献1 K" t1 X& O8 @) ?2 T1 A' N7 z
不用叫前辈，感觉像日本人。大家能到这边就是互相帮忙的。
1 w% f) }7 ?5 Q6 \; C+ a主要斑竹多给我几个包包到是正经事。. I9 k% V: R# l7 I/ o2 H3 O
有时我也要下载。
% G9 ^. }2 u4 [3 q另外，别一本书分成20份，每份都要8个包包，感觉像做要的宝宝太多了。

mmssyyee

请教一下，能不能用软琼脂实验来代替ips细胞的畸胎瘤实验啊？用软琼脂实验来说明ips细胞具有体外成瘤能力，来旁证ips的畸胎瘤实验。