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如何使悬滴产生的EB在培养基中悬浮培养?   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2010-11-3 15:23 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近在做关于悬滴培养EB分化为心肌细胞方面的实验,但发现悬滴形成的EB取下后在培养基中一天就贴壁生长了。我们设想的是让EB在培养基中悬浮培养4-5天后再贴壁生长。我们尝试了一些方法,如不时的晃动培养板、吸管轻轻吹打等,均达不到理想效果。前一段时间我和师兄尝试了一种胶polyhema铺板后培养EB,虽然EB能够悬浮5-6天,但是EB不生长,而且3-4天后胶开始脱落并跟EB黏在一起了,最终失败而告终。" u# C0 b' Q  |
特发此贴,请教从事这方面的高手指教指教,有没有好的方法使EB悬浮培养?有没有较好的胶既可以让EB悬浮,又不对EB的生长分化有多大影响?请大家多指点一下。
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沙发
发表于 2010-11-3 16:19 |只看该作者
把摇床放在培养箱里,EB放在摇床上培养
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2010-11-3 22:28 |只看该作者
回复 2# yaner
! b/ A9 i# y. X  a# g
1 L" K7 Z' y+ t9 I( L8 M0 y/ f, Q: A9 i  Q6 i1 K* j
的确是个好方法,但是怎样才能把摇床放在孵箱里?电源在外面的话孵箱就关不严了。此外,EB一直出于晃动状态的话也不利于其生长,EB边缘细胞一直晃动的话容易脱落,不利于其生长。我们主要是想让EB能够悬浮,不要过早贴壁。
' `. c2 ]% q, \% h
2 ~, p' L2 m- P3 O8 u7 K5 G还是感谢你的建议!
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新手上路

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板凳
发表于 2010-11-4 14:51 |只看该作者
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报纸
发表于 2010-11-6 16:49 |只看该作者
回复 1# dilal
4 X; d* S8 }, n做EB培养可以使用公司专门生产的超低吸附孔板,EB是肯定不会贴壁的。
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地板
发表于 2010-11-7 00:00 |只看该作者
回复 5# fish_zbw1985
$ N: N  p  @% T; @2 q+ _$ D. z& ^. e: M9 {% \6 S( ?7 D
# A7 K; W& w* ^5 ?$ h
    我最近也查到了EB有两种培养板来悬浮培养,超低吸附培养板及美国BD公司的FALCON表明未处理的培养板。但是我不知道那种培养板更为合适,不知你是否用超低吸附培养板悬浮培养过EB。我想明确一下效果,顺便问一下你用的超低吸附培养板都是那个公司的,中国有没有代理?
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发表于 2010-11-7 07:55 |只看该作者
正常情况下培养,采用国产DISH ,一般国外的都是包被过的
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发表于 2010-12-30 12:34 |只看该作者
我告诉你吧,用那种培养细菌的培养板,国内的就可以,做心肌分化的话,现在盖上悬滴3天,形成大的球体后,收集到皿中,继续培养,非常好用。
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发表于 2011-1-4 21:17 |只看该作者
就用国产的细菌培养皿,浙江拱东的,直径有7厘米和9厘米两种。我们一直用这个,非常好用。
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发表于 2011-3-8 14:05 |只看该作者
国产的细菌培养皿?那不是玻璃的啊?
9 A. m6 @9 i" T" m! }8 e# {
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