贴壁神经神经干的诱导分化

jennyshy

有谁贴壁培养人的神经干细胞( m) j, F  J% r: R

7 f/ X! p. f" _最近诱导贴壁培养的人的神经干细胞分化，用ply-Lys 包被的皿
6 U* C. x6 Z4 N4 n& D培养基去除生长因子，加1μM 视磺酸（RA）诱导分化7d
. B8 h% V. Y$ M: T" g8 q) p6 \$ T0 L2 E, }5 j1 B
但是结果却让人郁闷：细胞由双极突变成细长状，有多死细胞，并没有看到典型的神经细胞样的结构, B% V! ~) E9 [8 x" k+ G- W
现在排除染菌和试剂等问题。
: V0 o( R$ ]. \1 a& h# Q请教大家如何解决。

lhmxm

我也做过，感觉RA的效果没有文献上说的那么明显

lhmxm

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+ h0 W) g2 e- l1 H  o' r+ R- \
! R% v! }+ v! M. ?4 u; }2 T2 ?( X请问你是怎么用PLL包被的，包被时间多久，包被后立刻就洗还是等干烘干了以后再洗，具体的步骤可以说下吗？

lhmxm

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+ a. c; A2 l: T' K
1 Y; k9 J! {, h& ]) b6 P确实，我也用过，感觉不到明显的作用

jennyshy

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' `7 l" T* U9 T/ z$ ?
8 A4 K+ B; M1 U, M* `( G  M0.1mg/mL包被，可以过滤用3-4次
6 `- i6 |  r7 _0 A8 z$ [37度或者室温过夜
: E0 {, o- v1 Q+ n. L/ r  B吸掉PLL后，不用烘干，PBS洗3次，晾干0 C: s; X3 o1 }" @8 n

2008xiao

我也准备用RA诱导神经干细胞分化，请问楼上几位RA该怎么溶解呢？用什么做溶剂？不敢随便用，怕影响细胞。多谢了！

lhmxm

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7 R' v* g3 A8 q& |! Y2 ?: D/ w/ J3 B0 B
要用DMSO来溶