贴壁神经神经干的诱导分化

jennyshy

有谁贴壁培养人的神经干细胞
; {. v$ L8 q( X# D% c+ i: I8 G4 y! k# G) W
最近诱导贴壁培养的人的神经干细胞分化，用ply-Lys 包被的皿/ c; G9 ~5 t9 w0 N. q
培养基去除生长因子，加1μM 视磺酸（RA）诱导分化7d
; ~6 y- b0 C% D' k  [
+ a+ H) G6 G' W. b5 p: c* V但是结果却让人郁闷：细胞由双极突变成细长状，有多死细胞，并没有看到典型的神经细胞样的结构
. i# i- d7 f0 N现在排除染菌和试剂等问题。
1 R" Y% S: P1 }- D5 ]" ?) P- d9 y请教大家如何解决。

lhmxm

我也做过，感觉RA的效果没有文献上说的那么明显

lhmxm

回复 jennyshy 的帖子8 V0 x% R3 \/ L* P
2 y9 D; D" w7 |1 o, K; Y- W
请问你是怎么用PLL包被的，包被时间多久，包被后立刻就洗还是等干烘干了以后再洗，具体的步骤可以说下吗？

lhmxm

回复 lhmxm 的帖子5 S: X7 E  G  U5 s, M( |

* \9 E# h2 W8 `' o3 t* _' H确实，我也用过，感觉不到明显的作用

jennyshy

回复 lhmxm 的帖子7 w. |8 o4 ~0 }3 ~9 U) l6 u1 D! \. c
& `3 R$ Y  W. s1 M" e* V
0.1mg/mL包被，可以过滤用3-4次% c: A' w$ `0 Q3 O$ _$ A4 d1 F
37度或者室温过夜1 y6 t/ k: z7 W
吸掉PLL后，不用烘干，PBS洗3次，晾干+ _! q3 r$ p) v+ S; F/ _

2008xiao

我也准备用RA诱导神经干细胞分化，请问楼上几位RA该怎么溶解呢？用什么做溶剂？不敢随便用，怕影响细胞。多谢了！

lhmxm

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) R7 M  J3 d, F7 v; g要用DMSO来溶