求助小鼠骨髓间充质干细胞几个问题（附图）

若兰汀

我说一下自己的经验，希望对你有帮助。1.老鼠的选取，我用4-6周龄Balb/c雌鼠，c57的细胞活力比Balb/c的强；2.老鼠断颈处死在酒精中浸泡5-7分钟，无菌分离双侧股骨和胫骨，我采用剪掉骨端的骨骺避免有碎的骨渣，1ml注射器吸取DMEM：F12完全培养基冲洗骨髓腔至骨头发白，冲洗的时候最好在培养皿上放一张尼龙膜可以滤过凝固的骨髓块。3.培养基为DMEM：F12+10%FBS；4. 24小时后全量或半量换液；以后2-3天换一次液，小鼠MSC细胞要传4-5代才能尽可能去除杂细胞。你需要保证纯度首先要保证细胞量要大，不然细胞很难贴壁很难养，分离的时候要保证无菌快速否则肯定会凝血凝骨髓。我有同学分离肺部内皮细胞，他在分离前把肝素钠注射到老鼠体内这样避免凝血，你可以试试。祝好运