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求助茜素红粉剂的配方! [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-11-15 20:56 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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刚购买sigma公司的茜素红粉剂,准备做间充质干细胞的成骨诱导的钙结节染色,苦于不知道如何配置染液,求教各位高手,不胜感激!!!

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沙发
发表于 2010-11-15 21:10 |只看该作者
顺便再请教一个问题:茜素红染色的具体步骤如何?麻烦告知!!不胜感激!!!

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藤椅
发表于 2010-11-15 21:29 |只看该作者
我现在也要做茜素红染色,也是诱导MSC为软骨,你用的是茜素红s吗?好像染组织和细胞用的不是一种茜素红,染细胞用的是茜素红S。
( Z: g6 X6 E$ w, g【步骤】  ' e4 a+ _  e% P0 U
(1)培养皿用PBS冲洗2次,95%乙醇固定10min,双蒸水冲洗3次。  
7 S, R- I  i7 x) U0 d(2)0.1%茜素红-Tris-Hcl(PH 8.3)37℃,30min。  
+ D# F4 u1 u' P2 L8 p: a" \) t! v7 ^(3)蒸馏水冲洗,干燥,封片。9 G- z2 t+ G# m$ b
茜素红用Tris-Hcl(PH 8.3)溶解。Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L)
+ V$ m2 f2 R6 K50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升" D0 Q* F3 @/ L/ g5 J
pH (25℃) X (mL)
1 a) @6 T% V/ [4 `" r: Y/ a4 B. Y7 M! F
7.10 45.7
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7.50 40.3
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& _! [2 T) ]* W/ ~7.70 36.6 8 W8 }% F* r2 G9 i; D% E0 S
7.80 34.5 5 Y, e3 Z) Q( D: f" J6 \6 M
7.90 32.0
7 P+ u. q' ~! B3 U6 Q8.00 29.2
6 f: Q  D5 r1 @" v: l! G7 \' C8.10 26.2
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* k$ L, ^& b, Z0 O8.30 19.9
$ V! m0 k, s* D+ [0 s( k8.40 17.2 1 S2 y, o/ @- A
8.50 14.7 : o8 s! J: K  Q) d' I9 p
8.60 12.4
+ q4 x9 [" J, I7 X' S8.70 10.3 0 c3 f0 e+ W0 l$ @! ]( G# z: u
8.80 8.5
) R5 Z; E% k; v# y- `6 K# I8.90 7.0
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板凳
发表于 2010-11-15 21:29 |只看该作者
我现在也要做茜素红染色,也是诱导MSC为软骨,你用的是茜素红s吗?好像染组织和细胞用的不是一种茜素红,染细胞用的是茜素红S。
; }9 ~! F- [, H( J1 O# \: r) a【步骤】  
: C" M9 q- L8 q. ?(1)培养皿用PBS冲洗2次,95%乙醇固定10min,双蒸水冲洗3次。  
4 B2 k# ]  ?3 s+ o) S(2)0.1%茜素红-Tris-Hcl(PH 8.3)37℃,30min。  
* \# K! R7 {8 Z' o7 p1 l(3)蒸馏水冲洗,干燥,封片。8 K  O$ k8 u- ]) |2 f" Z
茜素红用Tris-Hcl(PH 8.3)溶解。Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L)
, g8 u7 U9 R4 A$ I9 F7 {50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升& z& k9 F7 K8 U  ^8 a3 U
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8.10 26.2
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8.30 19.9
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% [+ e. k- X4 @+ X5 @4 y1 ?8.60 12.4 $ f" J3 f3 F+ n( k' @( }
8.70 10.3
: V" M5 I; {# v) R8 i. I) H8.80 8.5 ! O& r+ h$ C, ^: z' f
8.90 7.0

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报纸
发表于 2010-11-15 22:15 |只看该作者

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地板
发表于 2010-11-16 18:02 |只看该作者
回复 4# lipd09@mails [/b7 F$ }* M0 W% X0 O
谢谢
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