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我现在也要做茜素红染色,也是诱导MSC为软骨,你用的是茜素红s吗?好像染组织和细胞用的不是一种茜素红,染细胞用的是茜素红S。
# e' E; \5 N1 R* a3 Z【步骤】
! \! l$ @. B& J- Q4 B; T' p$ g(1)培养皿用PBS冲洗2次,95%乙醇固定10min,双蒸水冲洗3次。
) D! P2 U9 e+ [, k2 d& Q, R6 B1 {(2)0.1%茜素红-Tris-Hcl(PH 8.3)37℃,30min。 % P6 B! h. N$ n1 v, o8 c9 o0 a
(3)蒸馏水冲洗,干燥,封片。7 w9 M8 M0 f; Q# |( w2 L S' h$ A
茜素红用Tris-Hcl(PH 8.3)溶解。Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L)
2 J1 |3 s- n2 r( Q+ h# n50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升
' \* u9 ?2 v3 ~- epH (25℃) X (mL)
}3 C" {% D4 B# y& d( A7 w3 N# J# t: y' I3 o* ]- z
7.10 45.7 ( d) g5 a1 V* Y9 T7 c7 ]* a
7.20 44.7
, o. M( }" L& a5 _0 I9 R7.30 43.4
1 R* |* o5 q {1 c' s% H$ {* N7.40 42.0
8 x, U; s0 e# K! R! O0 e4 ]' w7.50 40.3 + F+ C; X8 t! H
7.60 38.5
7 D D. B( c) N! E/ ]9 m: H, x" c7.70 36.6
2 J, i0 m! c5 [7.80 34.5 8 q, m0 G( r/ C7 y; G) o) w( A% x0 h0 |
7.90 32.0 9 U: N3 [ O' P" S/ A' y% }, _
8.00 29.2
3 g( H% u3 m9 g7 ]- V2 r8.10 26.2 ; ? ?# T8 }/ w
8.20 22.9 9 _# G3 g9 U- E
8.30 19.9
1 @9 w' h( B6 e% H! |: f8.40 17.2
8 t9 f& I0 ^* k; X1 C8.50 14.7 3 }, c* N7 C; z- P& P# X J1 a
8.60 12.4
" c5 _ `8 v) E: d) `4 {8.70 10.3 7 G9 s# l7 m* j- V
8.80 8.5
/ B. w; R1 x# C5 }* |2 [8.90 7.0 |
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