干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 28529|回复: 5
go

求助茜素红粉剂的配方! [复制链接]

Rank: 2

积分
241 
威望
241  
包包
1470  

优秀会员

楼主
发表于 2010-11-15 20:56 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
刚购买sigma公司的茜素红粉剂,准备做间充质干细胞的成骨诱导的钙结节染色,苦于不知道如何配置染液,求教各位高手,不胜感激!!!

Rank: 2

积分
241 
威望
241  
包包
1470  

优秀会员

沙发
发表于 2010-11-15 21:10 |只看该作者
顺便再请教一个问题:茜素红染色的具体步骤如何?麻烦告知!!不胜感激!!!

Rank: 2

积分
113 
威望
113  
包包
621  
藤椅
发表于 2010-11-15 21:29 |只看该作者
我现在也要做茜素红染色,也是诱导MSC为软骨,你用的是茜素红s吗?好像染组织和细胞用的不是一种茜素红,染细胞用的是茜素红S。8 J, e8 Z5 M3 I2 R+ m5 v
【步骤】  
+ h- e: H* E0 [  v9 `(1)培养皿用PBS冲洗2次,95%乙醇固定10min,双蒸水冲洗3次。    b4 j& i  a% t7 x6 `
(2)0.1%茜素红-Tris-Hcl(PH 8.3)37℃,30min。  
' N7 {1 B7 @, e( Q* @1 D3 ]3 o6 h(3)蒸馏水冲洗,干燥,封片。
! l* w0 V( k% @茜素红用Tris-Hcl(PH 8.3)溶解。Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L) / Q1 w+ [) A  n: K9 C
50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升  P8 `) \) ?! Y: a
pH (25℃) X (mL)
# |; d1 C0 J2 w4 ^! p$ O
3 u; S5 I( {" g' x7.10 45.7
) N$ V! O9 b( L* n, p7.20 44.7 ( V0 S1 ]1 n, o# O$ ^
7.30 43.4 7 @" B# F2 F6 B$ M
7.40 42.0
* |6 u3 S' r+ w3 b' I7.50 40.3
# r: Z" L* N0 B6 f1 @/ D7.60 38.5 $ s. x2 n/ g$ [8 q1 o& x9 Y
7.70 36.6
. H; ?, t8 |+ e9 K3 B' U3 t5 y/ s7.80 34.5
8 L8 e: A- ]4 a$ \4 T" q9 A1 n7.90 32.0
! a* J) q$ j8 u: h" |3 D8.00 29.2
& G/ p2 M) H8 B" Q8.10 26.2 ) v1 S4 ^- [& Y+ D6 a! f4 ~
8.20 22.9
5 {  V" c1 F7 h, i6 u" y" a8.30 19.9 3 J; ~# K1 C/ ]
8.40 17.2
' V& W* R7 o3 [1 Q* J4 D7 [$ l8.50 14.7
3 ?: \$ I+ ?. \5 w8.60 12.4
( h) o" r: k) F: P! `1 a% q: o) k8.70 10.3 + c$ v/ J$ t1 O6 t$ G
8.80 8.5
7 Q" n6 V/ N" p9 v6 h8.90 7.0
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
113 
威望
113  
包包
621  
板凳
发表于 2010-11-15 21:29 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
我现在也要做茜素红染色,也是诱导MSC为软骨,你用的是茜素红s吗?好像染组织和细胞用的不是一种茜素红,染细胞用的是茜素红S。
# e' E; \5 N1 R* a3 Z【步骤】  
! \! l$ @. B& J- Q4 B; T' p$ g(1)培养皿用PBS冲洗2次,95%乙醇固定10min,双蒸水冲洗3次。  
) D! P2 U9 e+ [, k2 d& Q, R6 B1 {(2)0.1%茜素红-Tris-Hcl(PH 8.3)37℃,30min。  % P6 B! h. N$ n1 v, o8 c9 o0 a
(3)蒸馏水冲洗,干燥,封片。7 w9 M8 M0 f; Q# |( w2 L  S' h$ A
茜素红用Tris-Hcl(PH 8.3)溶解。Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L)
2 J1 |3 s- n2 r( Q+ h# n50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升
' \* u9 ?2 v3 ~- epH (25℃) X (mL)
  }3 C" {% D4 B# y& d( A7 w3 N# J# t: y' I3 o* ]- z
7.10 45.7 ( d) g5 a1 V* Y9 T7 c7 ]* a
7.20 44.7
, o. M( }" L& a5 _0 I9 R7.30 43.4
1 R* |* o5 q  {1 c' s% H$ {* N7.40 42.0
8 x, U; s0 e# K! R! O0 e4 ]' w7.50 40.3 + F+ C; X8 t! H
7.60 38.5
7 D  D. B( c) N! E/ ]9 m: H, x" c7.70 36.6
2 J, i0 m! c5 [7.80 34.5 8 q, m0 G( r/ C7 y; G) o) w( A% x0 h0 |
7.90 32.0 9 U: N3 [  O' P" S/ A' y% }, _
8.00 29.2
3 g( H% u3 m9 g7 ]- V2 r8.10 26.2 ; ?  ?# T8 }/ w
8.20 22.9 9 _# G3 g9 U- E
8.30 19.9
1 @9 w' h( B6 e% H! |: f8.40 17.2
8 t9 f& I0 ^* k; X1 C8.50 14.7 3 }, c* N7 C; z- P& P# X  J1 a
8.60 12.4
" c5 _  `8 v) E: d) `4 {8.70 10.3 7 G9 s# l7 m* j- V
8.80 8.5
/ B. w; R1 x# C5 }* |2 [8.90 7.0

Rank: 8Rank: 8

积分
306 
威望
306  
包包
3648  

小小研究员

报纸
发表于 2010-11-15 22:15 |只看该作者

Rank: 2

积分
241 
威望
241  
包包
1470  

优秀会员

地板
发表于 2010-11-16 18:02 |只看该作者
回复 4# lipd09@mails [/b/ E, F0 \9 L1 o* b  j
谢谢
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-6-15 12:46

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.