求助茜素红粉剂的配方！

qiongyacc

刚购买sigma公司的茜素红粉剂，准备做间充质干细胞的成骨诱导的钙结节染色，苦于不知道如何配置染液，求教各位高手，不胜感激！！！

qiongyacc

顺便再请教一个问题：茜素红染色的具体步骤如何？麻烦告知！！不胜感激！！！

lipd09@mails

我现在也要做茜素红染色，也是诱导MSC为软骨，你用的是茜素红s吗？好像染组织和细胞用的不是一种茜素红，染细胞用的是茜素红S。
) P5 |) D/ Q, N) `4 S0 t# `3 J【步骤】  1 Y. I. u) K' C' |
（1）培养皿用PBS冲洗2次，95%乙醇固定10min，双蒸水冲洗3次。  / J- a- |7 J4 U1 }0 J: G; p
（2）0.1%茜素红-Tris-Hcl（PH 8.3）37℃，30min。  
: h% f1 U, T- Z2 f（3）蒸馏水冲洗，干燥，封片。
+ C7 V. S" B# h* b% k' z茜素红用Tris-Hcl（PH 8.3）溶解。Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L） & n: P+ [3 ^5 i! l5 g9 c
50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升
! \0 [4 E3 F1 [$ {1 Q0 zpH (25℃) X (mL)
0 S1 Q4 ~3 ?- _( M& z% C( s: P+ |; u5 @1 Z3 f2 X9 M
7.10 45.7
3 T& m4 t( v2 }( @% e7 E7.20 44.7 4 P8 {+ N6 W: m% R2 v
7.30 43.4 ' p3 i1 p) Y5 f8 J8 u# N# G
7.40 42.0 # p2 `9 C/ j4 W- G
7.50 40.3 5 p  n  [9 R0 Q) f! i9 x& u4 S
7.60 38.5 - {) H4 N, X6 C4 q' y0 ]+ b: Q  V
7.70 36.6 7 U+ u3 I5 {# {4 V
7.80 34.5
6 w/ I) h( B+ |& {8 A1 D* p7.90 32.0
, ?* E6 A# M5 q0 N) Q2 @8.00 29.2
' n, @4 b0 }  s4 r# c8.10 26.2
' a1 X3 ]5 ~6 i9 D) I- R) Z8.20 22.9 4 K2 V! t# P. s* p% P% K
8.30 19.9
& q5 J. a9 @' s5 u) e8.40 17.2 7 G+ w0 f5 }! g& X( x
8.50 14.7 + X6 Q0 _! ^+ r7 d- z( W
8.60 12.4 . l* L  Q# s4 Q+ W: {4 ]+ z
8.70 10.3
6 i! w5 b- c0 Q! {/ y9 j8.80 8.5
5 B; T/ t$ p3 d, T% S# \3 J5 F8 c% u8.90 7.0

lipd09@mails

我现在也要做茜素红染色，也是诱导MSC为软骨，你用的是茜素红s吗？好像染组织和细胞用的不是一种茜素红，染细胞用的是茜素红S。
3 i0 F" a' K3 [% [  V2 ]5 c【步骤】  ) _+ N$ m, r8 k" w
（1）培养皿用PBS冲洗2次，95%乙醇固定10min，双蒸水冲洗3次。  
' k% V7 u& u( ]（2）0.1%茜素红-Tris-Hcl（PH 8.3）37℃，30min。  / G9 N6 `2 c) L' V
（3）蒸馏水冲洗，干燥，封片。& a+ s4 i) n0 @
茜素红用Tris-Hcl（PH 8.3）溶解。Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L）
# @+ ?3 d5 J- R! z4 N50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升
7 L$ ]. `1 I) A% ApH (25℃) X (mL)
* O7 K- g# Z9 k( |( D& K2 I% ~4 L8 j1 E1 }
7.10 45.7 7 |3 G. {8 _3 |9 |* v
7.20 44.7
; c, ]1 ?! Q, `( t! V7.30 43.4
3 m0 B& i* h+ J7 X6 H& Y7.40 42.0 5 |4 e( s' K8 @, w) x, a3 ^
7.50 40.3
0 V1 t/ t# Y* l- A5 N& J! X2 Q4 H7.60 38.5
# Z8 {" Z' b8 _7.70 36.6
) `2 ^" T! [& k. V% @: c7.80 34.5 & N8 D1 G+ ]3 U+ [! o: G* q
7.90 32.0 5 Q& h7 B2 M! G! e- H
8.00 29.2
4 b$ P, y$ e5 Y0 {+ l. ^; m$ ^# {8.10 26.2 ; _9 ?2 T+ N  v: |( m* `6 G
8.20 22.9
: J. k+ O  L; }4 z- Z' ~6 w# o8.30 19.9 * _6 [1 J2 A* X% t6 q+ L
8.40 17.2
6 m1 x4 X, J/ W5 ^8.50 14.7 * `9 ~" E1 x7 R! i
8.60 12.4
! \) X/ e+ h2 o: L+ M  C% O0 R8.70 10.3
- t% ?# G; p4 T4 L/ r8.80 8.5 1 @- ]8 d; R; {: v9 i+ \) K
8.90 7.0

细胞海洋

http://www.stemcell8.cn/viewthre ... =%DC%E7%CB%D8%BA%EC

qiongyacc

回复 4# lipd09@mails [/b
0 T  u; `6 I9 u+ ?5 ~* R谢谢