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今天早上去看我的细胞,长得满满的,心情那个好!
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1 J8 s( i6 _. G本来打算马上传代的,可我的器械瓶瓶管管还没消毒,正好大师姐打电话来说今天有几台大手术要我回科室帮下忙。- j# P/ C& e+ A
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! |8 P+ ?' l( h5 ?一看已经变黄的培养液,我好担心手术下午完了我细胞会胀死的,反复问了老师和同学,说几个小时没事的,才安心的走出实验室。4 i+ B# h7 H ?, s) K
( N: g0 s+ J" e0 |下午3点半,终于完手术了,拿着刚消好毒的宝贝,乐滋滋的到了实验室,顾不上疲劳,常规消毒工作台,然后开始
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5 t( S9 w0 [# O5 T0 d第一次做传代,也不懂,一个实验室的同学先给自己的细胞传代演示给我看了,一步步的详细的给我讲解,以及一些地方可能会犯的错误直接导致实验结果等。2 v A. r' s; L7 J9 Z
* q `4 v( z. W6 w7 n8 Z( {1 Y我还是像模像样的坐下,有意思的是,我这同学让我传三瓶,另一个实验室的一个同学呢让我传四瓶,为这他们争执了起来。, I) r1 Q% b% H- C8 {; T& r
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看他们争得面红耳赤的,我那方都不好得罪,只好听天由命了,我打开盒子,里面刚好有四个培养瓶,(废话,我自己打的包我当然清楚里面是多少个瓶子,但当面反对别人,肯定以后都没人敢帮我了,嘿嘿,想想自己挺阴险的!
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所以那个师兄也让步了,就既然这样干脆就传四瓶嘛!(其实我也想传四瓶,因为这样细胞多点,我多冻存点以后用着也宽心。)
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3 G/ Z5 n! Y+ u* F9 ^/ x/ M先把变得淡黄的培养液倒掉,加入1毫升胰酶消化,37度孵育30秒钟。镜下看,细胞间隙不是太大,师兄说还要 H- t! Z6 Q( t0 l0 _$ B
( a8 B, s2 y8 k6 l9 X' b; |消化一会,时间不够,因为他自己的细胞消化时间为1分钟。晕死今天实验笔记放车上了,所以当时也忘记我的HELA到底消化时间4 b8 [3 K! }# j2 ?
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是多少,本来想找网上的朋友求助的,但想想时间不待,我依希记得,我的HELA消化时间为1-5分钟,可那师兄- e! W1 }( {7 L
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说一般就1分钟,我也没有反驳的理由,所以就在那么几么几的,师兄说快别看了,赶紧中止消化吧,呆会消化过头了。
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哦,于是加了1毫升10%小牛血清配的培养基,倒掉,注意我这里说的这个倒掉,可能规范,正确的应该是用吸管3 B" j2 L1 ?/ P) ^. g$ S
( g: P: p' m; d1 q0 p4 K6 ^吸出来,但我师兄说如果操作好还是可以直接倒的,省事。
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再加7毫升培养基,反复吹打1分钟的样子,镜下看,好多成团状的细胞,贴壁的倒是比较少了,再吹打1分钟, L( D+ e2 M$ [: e
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镜下再看,没有很明显的成团状细胞,YEAH!
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开始分装,先再4个培养瓶里各加2毫升培养基,再分别依次分装,师兄叫我加的时候滴管要悬空,我当时也忘记问为什么了8 g/ E! A2 O4 h2 Z/ e
. N9 m1 T4 T. Q2 v5 N只是心里想,悬空的话这么高的下去,我的细胞摔死了怎么办,心里怎么想的就怎么说了出来,可想不到笑死在场的人了- \2 \) F4 O# H) q! o
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后来仔细想想觉得自己可够无知加白痴的!
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1 D1 a$ _ E7 a) A大概详细情况就是这样!累死了难得写了。
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也不知道这个帖子能给我加多少分! |
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