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有没有人做过用慢病毒转染ips细胞的 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-11-16 11:30 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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兄弟正在做了,有高人指教一下

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包包
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沙发
发表于 2010-11-16 11:37 |显示全部帖子
我的问题是用包装出来的慢病毒,纯化后,(慢病毒带有我需要的基因片段),转染IPS细胞,通过筛选得到单克隆。
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藤椅
发表于 2010-11-16 12:17 |显示全部帖子
我就是用慢病毒转染IPS细胞,转染后筛选,慢病毒含有我要的基因片段,什么地方不清楚呢?

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板凳
发表于 2010-11-16 19:06 |显示全部帖子
具体点行不行呢?多给点建议

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报纸
发表于 2010-11-17 15:53 |显示全部帖子
1 慢病毒怎么纯化滴度高?我是用的FuGene转染的,我纯化是直接通过超速离心获得病毒颗粒* _/ K( k9 M* x. B  X: i
2 我的ips本身带绿色荧光的,所以我转染后用荧光素酶筛选,因为质粒上带有fluc,可是每次做的转染效率不高,检测不出来
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