羊膜上皮细胞原代培养

vet2008

羊膜上皮面的粘液是些啥东西啊，是不是会影响胰酶的作用，进而原代做的很糟糕？做了很久羊膜上皮细胞的原代，时好时坏，希望诸位给点意见。

冬日柔光

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$ y  {4 j- x/ y4 j2 T羊膜在胎盘上，而且不是间充质细胞

上官冰梦

弱弱的问一句你们所谓的羊膜来源的间充质和脐带来源的区别是什么 羊膜在哪里啊

冬日柔光

0 l& @1 V& m! t4 l. i$ H1 P+ L
大家还在不在啊？真怕自己毕不了业啊……

冬日柔光

回复 gaorongbest 的帖子* I) ~, _8 }; z9 i8 t1 T( n

& @# q$ v5 T* T1 S我现在也遇到了分离出的hAEC细胞不贴壁的情况，大家有什么好的建议吗？  s# J3 c* ^, C5 v
我用的是胶原酶和胰酶消化的方法分离的，一开始做的时候细胞长的挺好的，现在分离出的细胞培养好多天都不贴壁，不知道是什么原因造成的，还望大家不吝赐教啊!
2 m- k9 z9 T6 |+ y4 i1 N先谢谢大家了。

ivy叶子

用胰酶消化前，可用机械法先将羊膜表面粘液部分刮去，可以用载玻片刮。然后再用胰酶，在37℃ 水浴中消化，这样得到的上皮细胞还是不错的。
& E" j. ]* H5 [* [* R5 }  l ) C4 T& l2 ^8 V$ Y5 e, ^+ z

一转身的距离

10ml羊膜？这个体积是怎么算的？

thomassun2008

我们实验室每10ml羊膜放入50ml离心管，用20ml 0.05%的胰蛋白+0.02%EDTA振荡消化60分钟后取出，轻轻地颠倒晃动20-30下，平均一张羊膜能得到6-10x10^7细胞。

柏林小杨

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请问你们用什么培养基养AEC啊？

gaorongbest

回复 一转身的距离 的帖子) O- p; v% W) ]% S9 h

# D0 j- j$ e2 R' tAEC具有密度依赖性，接种密度低的话不容易生长啊，我们一般都接种密度大一些，但是细胞贴壁伸展情况还是不理想，你们的呢？不知道问题出在哪里