我的BMSCs传到第五代细胞形态发生改变，是什么原因啊

xieaimei0325

我是新手，之前取了几次材骨髓基质干细胞，原代养到第六天就死了，后来发现我把瓶盖拧的太紧，二氧化碳进不去，细胞都憋死了。后来同学给了一瓶第三代的骨髓基质干细胞，我传至第五代时发现细胞形态由长梭形、纺锤形变成类圆形或多角形，但是细胞增殖速度还算正常，也没有看到明显的老化现象。师姐说可能是我上次传代不完全消化，先吹下来的细胞比较杂，或者是血清的比例有变化造成现在细胞形态各异。具体的原因我还是不太清楚啊，请各位大侠多多指教……现在养细胞养得真郁闷啊

daviddow

哈哈
% l% B5 A9 ^4 G) s# D: H瓶盖拧得太紧，造成细胞死亡？不会吧。最近的几篇文章都说没有氧气有利于干细胞生长。% x) J. G5 ?# e
要是你的细胞不苗条了，说明培养基有问题。还有，就是你传代是否及时。

joeandanna

请问楼主是哪里的 可否借给传个代。谢谢

267318024

首先说明一下，细胞应该不会憋死的哈，因为即使把瓶盖拧紧了，细胞自身还产生co2呢，所以说应该是没有很大关系的，不过有个前提是细胞换液的次数要勤一点，2~3天一次。至于你的传到第五代后细胞出现问题，要说培养基的问题，之前几代就应该出问题了，可能的原因是配好培养基的酸碱度出问题了，或者培养基的量，浓度之类的调整一下，含15%的血清，然后重新配一瓶，仅供参考哈！

luomx07

呵呵，又是个马大哈。新分离的细胞隔3天左右要换液呀，接种密度也别太低
0 @; Z0 k2 ]: ?% F9 `: P( M你同学给你的细胞你有改变培养体系吗?传代及时吗？处理的手法也是挺重要的

xieaimei0325

我是取材后24h就换液的，以后2-3d换一次，我跟同学用的都是GIBCO的血清和低糖培养基啊。后来发现瓶盖拧松了细胞长的挺好的，活性还挺好的，就是形态有点不正常，师姐前天让传代，今天看了下好像好点了，细胞变长了点，就死马当活马医了，继续养......今天打算重新取一批看看，嘿嘿，祝我好运吧

xieaimei0325

回复 3# joeandanna - W% P2 z$ }0 y$ Q9 _$ U' q
% X. P/ ?: _: u4 J9 \1 I
我是广东湛江的，离北京好远啊……你还是找近一点地方的借，方便带回去