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我的BMSCs传到第五代细胞形态发生改变,是什么原因啊 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-11-24 13:39 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我是新手,之前取了几次材骨髓基质干细胞,原代养到第六天就死了,后来发现我把瓶盖拧的太紧,二氧化碳进不去,细胞都憋死了。后来同学给了一瓶第三代的骨髓基质干细胞,我传至第五代时发现细胞形态由长梭形、纺锤形变成类圆形或多角形,但是细胞增殖速度还算正常,也没有看到明显的老化现象。师姐说可能是我上次传代不完全消化,先吹下来的细胞比较杂,或者是血清的比例有变化造成现在细胞形态各异。具体的原因我还是不太清楚啊,请各位大侠多多指教……现在养细胞养得真郁闷啊
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2010-11-24 19:06 |只看该作者
哈哈4 N8 i1 i+ ^+ @, h8 u
瓶盖拧得太紧,造成细胞死亡?不会吧。最近的几篇文章都说没有氧气有利于干细胞生长。
* s) s' t9 r  b' o7 N7 n要是你的细胞不苗条了,说明培养基有问题。还有,就是你传代是否及时。
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藤椅
发表于 2010-11-24 20:48 |只看该作者
请问楼主是哪里的 可否借给传个代。谢谢

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板凳
发表于 2010-11-24 22:28 |只看该作者
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首先说明一下,细胞应该不会憋死的哈,因为即使把瓶盖拧紧了,细胞自身还产生co2呢,所以说应该是没有很大关系的,不过有个前提是细胞换液的次数要勤一点,2~3天一次。至于你的传到第五代后细胞出现问题,要说培养基的问题,之前几代就应该出问题了,可能的原因是配好培养基的酸碱度出问题了,或者培养基的量,浓度之类的调整一下,含15%的血清,然后重新配一瓶,仅供参考哈!
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报纸
发表于 2010-11-25 12:01 |只看该作者
呵呵,又是个马大哈。新分离的细胞隔3天左右要换液呀,接种密度也别太低* M+ p3 F% [: t* e. l
你同学给你的细胞你有改变培养体系吗?传代及时吗?处理的手法也是挺重要的
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地板
发表于 2010-11-26 09:50 |只看该作者
我是取材后24h就换液的,以后2-3d换一次,我跟同学用的都是GIBCO的血清和低糖培养基啊。后来发现瓶盖拧松了细胞长的挺好的,活性还挺好的,就是形态有点不正常,师姐前天让传代,今天看了下好像好点了,细胞变长了点,就死马当活马医了,继续养......今天打算重新取一批看看,嘿嘿,祝我好运吧
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发表于 2010-11-26 09:52 |只看该作者
回复 3# joeandanna 3 J0 l9 O/ E" W+ W: b9 i
3 p( z) S4 c( w6 N& k8 U. C3 Q
我是广东湛江的,离北京好远啊……你还是找近一点地方的借,方便带回去
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