求助：细胞复苏问题

hawkyiger

建议按楼上的试试，省去离心步骤，直接加完全培养基培养（如果不放心的话可以加的多一点，在低浓度下冻存保护剂对细胞损伤不大），然后次天换液，祝你好运

andyz0922

先将冻存的细胞 加入 20%血清 培养基 中 培养 * P/ L; m7 \- V

' t  I% i# l6 a$ |& x$ e8 O' [待细胞贴壁后 及时换液  这样细胞估计就会多些了
& ^! d6 M$ Q) M$ ?, u, k* f
' m+ A$ f1 U4 O6 ]) Q5 h不妨 试一试  因为你的细胞数少一定是你在接种前 的操作问题 $ `( o4 Z, l0 }# ~" o) ?  |3 ]0 ~

! r; D+ F/ Y- e* k% Y; t' T不是 吹打 就是 离心   这样做一次 若还是少的话 就无奈了

蛮蛮1984

也有可能是细胞本来就有问题

蛮蛮1984

是不是解冻的速度不够快，时间太长，最好是在水浴里一分钟之内解冻

shiqingxi

要是实在吹不散 怀疑你的细胞冻存前就不好，细胞死了才会有团块的。

2006goodluck

吹打的次数多一些，但只要温和一些，对细胞的机械损伤应该不是很大

luoye1986

谢谢各位前辈的指导！
" \7 F# t- X8 Y我准备再按照正确的方法试试。
3 f0 O5 ^, Q" U$ B
6 ?" O5 L0 P1 @- s" v) ], v还有个问题，多大的转速比较好呢？有朋友告诉我说 ...
9 g5 d% g$ }3 t# y* e) u( Hcherrydeng2006 发表于 2010-11-26 13:35

( A4 v; ^5 J3 ]8 M
! l; \$ U7 D1 {# p- \# K/ Z+ q0 H( `) q" A0 u! k( R$ l6 E
    无血清培养基不是完全培养基不影响复苏效果

luoye1986

对，吹打次数太多对本来就刚复苏的细胞造成了机械损伤，而且离心速度是不是偏低了些，我们通常都是1200-1500 rpm的