MEF及饲养层的制备（实验记录）

CQ熊猫猫

回复 1# nculsa747
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& N8 D  Q5 s* |6 ?       楼主你好，我想请问下关于丝裂霉素C处理成纤维细胞问题。" ~$ d* R5 z5 c5 F
    我现在的成纤维没用丝裂霉素C处理，成纤维长得飞快，而iPS细胞长得很慢，估计是营养跟不上还是其他的啦？因为师兄买的丝裂霉素C是国产的，有效期只有3个月吧，已经过期了，所以才没用的。
5 ~1 }$ v, p, _8 t/ C    所以我想问一下，如果我用丝裂霉素C处理成纤维的话，可以复苏后再处理吗？因为冻之前处理的话，我害怕复苏效果不好。但是如果复苏后处理，丝裂霉素C有效期又要必须长才行，纠结啊......% V7 e% X. }+ ~. \0 E6 G3 w& r
      还有就是，我用六孔板养的细胞，一次加多少丝裂霉素C工作液啊？% x% X1 X6 U( f3 n) J3 K) s
    科研计费不多，所以想丝裂霉素C这些试剂都只能买国产的，惨啊！！！
7 g& p  R. w5 q* W    非常感谢

CQ熊猫猫

回复 6# nculsa747
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; `  P' L! k7 n% H0 r    谢谢你的建议，其实我不是诱导iPS细胞，我是买的iPS细胞株，向心肌细胞分化！) c! s4 q6 r! J7 U0 \. [
  之前我师兄真的没用丝裂霉素C处理，就直接把iPS细胞种在成纤维上面，传代后，差贴下来的成纤维又会长出iPS团来。但是我还是想处理下成纤维细胞，这样iPS细胞也许会长得快些。
. p2 J) L- J! a! a. k. Q) H  u$ ]  制作成纤维的时候，我是用的10cm的大培养皿，冻之前改培养在6孔板的，方便以后复苏iPS细胞，因为iPS细胞不能大规模的培养，所以才用的6孔板
8 E# @8 O) i2 [9 W( r( B; W% t3 D  请问国产的丝裂霉素C那个公司的比较好，有效期比较长，呵呵！谢谢了