MEF及饲养层的制备（实验记录）

CQ熊猫猫

回复 1# nculsa747
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       楼主你好，我想请问下关于丝裂霉素C处理成纤维细胞问题。
. V0 c1 D5 G  V) Y; S6 S, C    我现在的成纤维没用丝裂霉素C处理，成纤维长得飞快，而iPS细胞长得很慢，估计是营养跟不上还是其他的啦？因为师兄买的丝裂霉素C是国产的，有效期只有3个月吧，已经过期了，所以才没用的。. Q: z! P& y8 i3 w+ p* K
    所以我想问一下，如果我用丝裂霉素C处理成纤维的话，可以复苏后再处理吗？因为冻之前处理的话，我害怕复苏效果不好。但是如果复苏后处理，丝裂霉素C有效期又要必须长才行，纠结啊......, [* K0 `, j6 q" y. P( w3 ~8 E
      还有就是，我用六孔板养的细胞，一次加多少丝裂霉素C工作液啊？4 W9 t! I& G9 d) U( }& [2 ?2 W
    科研计费不多，所以想丝裂霉素C这些试剂都只能买国产的，惨啊！！！; }0 s% _, L$ b& h1 |; @
    非常感谢

CQ熊猫猫

回复 6# nculsa747
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    谢谢你的建议，其实我不是诱导iPS细胞，我是买的iPS细胞株，向心肌细胞分化！. v9 v9 y8 a1 W& M
  之前我师兄真的没用丝裂霉素C处理，就直接把iPS细胞种在成纤维上面，传代后，差贴下来的成纤维又会长出iPS团来。但是我还是想处理下成纤维细胞，这样iPS细胞也许会长得快些。
  g5 r8 Y# p2 k: G2 g! h  制作成纤维的时候，我是用的10cm的大培养皿，冻之前改培养在6孔板的，方便以后复苏iPS细胞，因为iPS细胞不能大规模的培养，所以才用的6孔板
/ o; [) V# U& k! i" x5 B4 o0 u  请问国产的丝裂霉素C那个公司的比较好，有效期比较长，呵呵！谢谢了