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支原体检测有什么好的方法? [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2010-11-25 14:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
大家都知道,ipsc最怕污染,尤其是支原体感染不易发觉,大家有什么好的办法去鉴定细胞是否被支原体污染,敬请指教。
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沙发
发表于 2010-11-25 15:12 |只看该作者
你可以咨询相关试剂公司,有支原体检测试剂盒出售。
8 E1 {. c) M7 b! N! p' x7 u* N. o! m$ E3 B4 M( ?! Y
你也可以用荧光显微镜,通过对样本染色,观察细胞周围是否有小亮点。- `% }4 K, G7 d  ]3 H7 b
) [9 U5 m# e* d: L* `) w8 U
方法很多的
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优秀版主 帅哥研究员 积极份子 小小研究员 金话筒

藤椅
发表于 2010-11-25 15:30 |只看该作者
貌似有支原体攻克试剂盒哦!可以考虑考虑!
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板凳
发表于 2010-11-25 16:08 |只看该作者
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大家有没有自己的经验呢?

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报纸
发表于 2010-11-25 16:09 |只看该作者
可以pcr分子鉴定,或者肉汤培养法检测,再者是hoechst染色
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地板
发表于 2010-11-25 17:51 |只看该作者
我也做过hochest染色,但是不怎么会看。有没染过阳性的图片,上传一张参考参考谢谢哈!
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发表于 2010-11-25 21:35 |只看该作者
除了用VERO细胞做Hochest染色外,直接染培养细胞也可以吗?
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发表于 2010-11-26 19:30 |只看该作者
支原体检测一般有四种$ w; P  @8 ~. E) F! o
1 支原体荧光检染色 培养物用Hotchst 33258 原理与DNA特异结合 因此将培养细胞固定染色后 观察细胞核外是否有荧光即可 6 m6 Q  ^: g2 I9 z- F: r2 @
2 PCR检测 一般是德国公司的试剂盒 Braunschweing DSMZ % ]7 l+ p+ C* e3 E. J4 e8 ~4 x
3 微生物培养 这样方法缺点不许有养活的支原体做阳性对照 而且还需要微生物背景知识" v( y4 m# K$ F" i9 V: G& ^
4:分子杂交 建议不用这方法。
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发表于 2011-1-6 20:01 |只看该作者
一般公司用的是分子杂交的方法和微生物的方法,这都是国家要求的方法,灵敏度还可以,但是没有 PCR检测好。
9 j1 J2 t0 `1 \4 B$ Z  _4 f% z# a3 o6 K8 Y$ R6 h& O
PCR一般的实验室都有,用PCR检测很好的,现在检测支原体的试剂盒国内国外的都有,拿来直接做,简便快捷, 如果你的经费多的话 就用国外的。
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发表于 2011-1-9 23:03 |只看该作者
国内有单位检测的 需要支付一定费用 北京干细胞库提供这项服务 用的就是pcr分子鉴定,肉汤培养法检测及hoechst染色这三种方法。
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