羊膜间充质干细胞如何培养？

流云阿凯

以下使我们实验室的常用方法，供参考：
9 p) x; m& z" u  k- u3 t/ s①无菌条件下取正常足月剖腹产胎儿的胎盘共10个, 钝性分离胎盘脐带面的羊膜约10 cm *10 cm, 用PBS缓冲液充分冲洗
  Z  x. A9 c4 L* c②将羊膜尽可能剪碎, 加入2. 5 g /L的胰酶, 37 度消化30m in, 终止消化后将液体倒掉③再以终浓度为1. 0 g /L胶原酶和0. 1 g /L DNA 酶37 度 消化2h左右。过不锈钢网将消化下来的细胞制成单细胞悬液
+ o9 u4 e5 C9 k8 h, j' x0 ?④1 000 r /m in离心10m in收集细胞, 苔盼蓝染色,计数活细胞, 以2*105 m l- 1接种于75m l培养瓶内
  m# b3 ~7 y- M- \上述方法是我最近分离常用的方法，效果不错，基本两天左右就能有贴壁细胞，然后换液即可

流云阿凯

回复 细胞海洋 的帖子: {% k* E1 V; d; }5 t& S. Z) c. y/ g

6 t; f) H, l' U你好，请问你一个胎盘上全部的羊膜你最后分成几瓶？我是分成两小瓶的，而且你最好也把最后没有完全消化的组织块也培养一下，大概三天左右吧！你会发现也有不少的细胞！然后就是先简单的传代净化！基本上最多五天就可以长满！

流云阿凯

回复 清影VS猪猪 的帖子9 G) F3 c# V4 B+ Z% a2 V
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你好，请问你一个胎盘上全部的羊膜你最后分成几瓶？我是分成两小瓶的，而且你最好也把最后没有完全消化的组织块也培养一下，大概三天左右吧！你会发现也有不少的细胞！然后就是先简单的传代净化！基本上最多五天就可以长满！