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大家看看我的油红o染色   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-11-29 14:10 |只看该作者 |正序浏览 |打印
成骨染色没出来,不知道什么原因,是色素的原因么?茜素红和茜素红s不是一个东西吧,请做过的给点指导
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发表于 2011-7-10 19:21 |只看该作者
zgzjhzxyj 发表于 2011-7-8 09:18
( e) V0 @. g: s# T回复 a66956695 的帖子
8 N9 V- p' Q# F% c4 I5 b, N" y
. V  A6 m- X9 q( _" N" g0 q  Y培养皿中细胞达到 80 %汇合后更换成脂诱导培养液(H-DMEM 培养液 ,10 % FBS , 地塞 ...
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晕了,最后一句少打个字,现在才发现,应该是“地塞米松起主要诱导作用,但个人感觉胰岛素的浓度也很重要,以前用10 ug/ml 就没成功。”希望还没误导他人!罪过
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发表于 2011-7-8 11:11 |只看该作者
谢谢zgzjhzxyj高手的教导,收到了

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发表于 2011-7-8 09:18 |只看该作者
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回复 a66956695 的帖子9 R% r6 U; [( F3 q2 ~( F: n/ k3 I
$ W8 Q: G# X' T# B& @2 A
培养皿中细胞达到 80 %汇合后更换成脂诱导培养液(H-DMEM 培养液 ,10 % FBS , 地塞米松 1uM , 胰岛素10uM , 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,IBMX 0.5 mM ,吲哚美辛 60uM),每3天换液一次,诱导3周。
8 a! Y+ H! c7 X+ S0 B也有文献上用的培养基是:L-DMED 或 a-MEM,如果不差钱的话,建议直接用商品化的脂肪诱导培养基,好像是2000-3000元一瓶,比较省心。
2 X9 e$ @/ s4 `1 Y3 j+ B地塞米松起主要诱导作用,但个人感觉胰岛素的浓度也很重要,以前用10 ug/ml 就诱导成功。0 f, e1 z9 ^; L1 n
祝你实验顺利!
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发表于 2011-7-8 01:44 |只看该作者
回复 zgzjhzxyj 的帖子
8 M& J4 M5 |8 ?( R  v
: K  e" Z3 b  o1 Q8 G/ A能否请教诱导液配方,太漂亮的….因我老鼠msc分化不成功,谢谢

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发表于 2011-7-7 22:09 |只看该作者
脂滴不明显啊,效果不好
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发表于 2011-7-7 11:30 |只看该作者
回复 stemcell8 的帖子! x( y8 W9 X; S! l
. y& N5 I6 j2 X1 d2 P0 x
在肉眼看钙化结节就是一个点。一个一个的!有人说一般在钙化实验的第14天就能出现。在显微镜下的就没有很准确的说法!一般在结节点的最外围的结构最清楚。
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发表于 2011-7-7 11:07 |只看该作者
右上角的像是色素沉着!图片下方的,感觉有点像,但是你的图片太模糊了,细胞形态都看不清!提供一张我最近的油红O染色,虽然颜色比较浅,但大致还是看得清楚的!
+ P. J3 E; y0 w; r3 R& z
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发表于 2010-11-29 21:26 |只看该作者
回复 robort45 的帖子" p/ L4 C4 {* Y( u* d
" v( d8 [, u- P
那个是最开始染色,后来的要好很多,但是一直不清楚钙结节应该是什么样子的

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发表于 2010-11-29 18:58 |只看该作者
我的成骨诱导也出现了问题,一直没有得到解决。ALP染色得两天才能显出来,不是 几个小时就可以的么?
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