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关于脐带血分离的疑惑,请高手进来 [复制链接]

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楼主
发表于 2010-11-30 09:12 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
The UCB samples were mixed with the Hetasep solution (StemCell Technologies, Vancouver, Canada) at a ratio of 51, and then incubated at room temperature to deplete erythrocyte counts. The supernatant was carefully collected and mononuclear cells were obtained using Ficoll density-gradient centrifugation at 2,500 rpm for 20 min. The cells were washed twice in PBS.- L3 J- c2 S) P
疑惑1.Hetasep solution是指的红细胞裂解液么 ?
+ ~% d7 ]- |7 p; j4 D4 j7 e    2.The cells washed twice in PBS.?需要离心不?转速?1000RPM/M*5MIN ?
# q8 q: f% @1 C, O: W1 U; x, K/ { 求高手指点一下!!!
' E; M) T1 I$ [7 n9 n0 g6 S如果大家有什么好分离的方法,给我顶一下啊 ,自己分离过几次细胞都不怎么样, 谢谢啦
9 R$ K7 C0 Y/ ^& l% c7 x
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帅哥研究员

沙发
发表于 2010-11-30 10:34 |只看该作者
我以前见过别人做过,需要离心,转速好像是1400RPM,你试试看行吗。
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优秀版主 金话筒 新闻小组成员

藤椅
发表于 2010-11-30 10:35 |只看该作者
Hetasep solution 与UCBMIX后可除去红细胞,PBS洗可用1200RPM,上面方案没有问题,当然你也可以采用明胶FICOLL法分离,
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板凳
发表于 2010-11-30 14:35 |只看该作者
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HS是羟乙基淀粉,用于沉降红细胞,与血液的比例是1:5,对细胞无毒无伤害,洗涤当然要离心啊,第一遍1200,第二遍1600。不建议用红细胞裂解液,对细胞有伤害。
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报纸
发表于 2010-12-1 12:51 |只看该作者
脐带血培养周期太长 目前还没统一的方法 希望能在此得到提升
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地板
发表于 2010-12-1 15:26 |只看该作者
谢谢 各位大虾的指点啊
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