如何把神经干细胞铺板铺的更均匀

SVZ

大家好，我现在在做神经干细胞的细胞免疫荧光染色，现在遇到问题如下，请大家帮我指点一下，谢谢！
$ I8 w8 _/ N$ T; H1。 经常会有神经干细胞贴壁不均匀的现象，请问大家有什么铺板均匀的诀窍吗?1 {, V$ }: c2 n# w8 ]6 @$ u1 l
2. 如果做细胞免疫荧光染色，用24孔板做增殖鉴定，大家常用的细胞铺板密度是多少？每孔加多少培养液？: m3 I% r; t: r0 A7 [# f
3。大家有没有觉得比较好用的细胞计数的图像分析软件？能否推荐一下。
9 C8 e# D* d! F8 f* B6 \$ p7 D' E4 w+ S8 t  T% _
谢谢！！！！！！

青萍红檀

请问你的盖玻片怎么处理的，是用5%的HCL浸泡的吗？5%的HCL是怎么配制的，我好像配错了，谢谢

SVZ

呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

ngu3314

1. 加入细胞后将培养皿作"米"字型的晃动数次+ u; V, c/ x2 `9 a3 s8 d6 Z
2. 我通常加约50,000~100,000左右的细胞，每孔约0.5 ml培养液: D5 v! p7 P* Y8 z9 D- a# D* y3 P+ i
3. 我都用ImageJ，免费又强大好用，网路上也可找到很多教学
$ A* {3 x$ P9 i" P
, ^, o7 p9 _2 @提供参考

SVZ

回复 ngu3314 的帖子  D& C. b/ f8 M( N) s

, @: b5 Y& W2 Y学习了，谢谢！

fmmufjz

先加培养基，再把细胞悬液打进去，在放置板子时要放平稳，这样细胞一般都会分布均匀……

fmmufjz

先加培养基，再把细胞悬液打进去，在放置板子时要放平稳，这样细胞一般都会分布均匀……

signext

SVZ 发表于 2010-12-14 21:17 $ \+ V( ]8 l; f3 Q8 U, ~
呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

* T7 y; g- A2 L" J: D- T直接染色做免疫细胞化学？ 效果怎么样？ 操作有什么不同？有什么注意的？" W% X" B+ a% r" ?9 C
确实，爬片太麻烦了

signext

SVZ 发表于 2010-12-14 21:17
. A0 z2 Q! ?; |( r# r呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

  l! W% p& t- u# i直接染色做免疫细胞化学？ 效果怎么样？ 操作有什么不同？有什么注意的？+ ~4 Z: w% `  Z& @! ?( c# P
确实，爬片太麻烦了

signext

SVZ 发表于 2010-12-14 21:17
4 V5 b! X3 g: M6 G( W9 }3 {# F; r$ b6 j呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

0 V/ K4 z1 C0 H9 N0 }- i9 s直接染色做免疫细胞化学？ 效果怎么样？ 操作有什么不同？有什么注意的？' [/ f# l0 r$ b2 s5 Z& e
确实，爬片太麻烦了