如何把神经干细胞铺板铺的更均匀

SVZ

大家好，我现在在做神经干细胞的细胞免疫荧光染色，现在遇到问题如下，请大家帮我指点一下，谢谢！
5 N! l1 X* q. P$ T: S' s1。 经常会有神经干细胞贴壁不均匀的现象，请问大家有什么铺板均匀的诀窍吗?; z1 j! P0 d1 u+ Q' r/ P+ c
2. 如果做细胞免疫荧光染色，用24孔板做增殖鉴定，大家常用的细胞铺板密度是多少？每孔加多少培养液？
# O8 u9 t  p6 B& E# J3。大家有没有觉得比较好用的细胞计数的图像分析软件？能否推荐一下。' J4 ~( l: X/ i9 o, X( Q- l2 X

  ]3 o5 `  x* K* w+ L4 j! i谢谢！！！！！！

青萍红檀

请问你的盖玻片怎么处理的，是用5%的HCL浸泡的吗？5%的HCL是怎么配制的，我好像配错了，谢谢

SVZ

呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

ngu3314

1. 加入细胞后将培养皿作"米"字型的晃动数次. `' D5 [' k/ @4 g
2. 我通常加约50,000~100,000左右的细胞，每孔约0.5 ml培养液: N, @- {9 [2 ]3 b+ f
3. 我都用ImageJ，免费又强大好用，网路上也可找到很多教学! q, p6 ?1 b# O5 ^3 x; x

7 y5 y0 z( a9 R提供参考

SVZ

回复 ngu3314 的帖子
+ L* U# o. @5 A1 ]1 E) i, b; X$ {4 y& `1 ]) u# a, ^
学习了，谢谢！

fmmufjz

先加培养基，再把细胞悬液打进去，在放置板子时要放平稳，这样细胞一般都会分布均匀……

fmmufjz

先加培养基，再把细胞悬液打进去，在放置板子时要放平稳，这样细胞一般都会分布均匀……

signext

SVZ 发表于 2010-12-14 21:17 % o+ Q# ]6 ^9 T( {2 D- ^1 f  {
呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

, p8 j3 Z% _9 c! H4 z' I: D直接染色做免疫细胞化学？ 效果怎么样？ 操作有什么不同？有什么注意的？
1 ^0 ]) R5 ?  x7 S; \" Y  O/ `确实，爬片太麻烦了

signext

SVZ 发表于 2010-12-14 21:17 & P; a  y  b  N; i  z0 a& b
呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

, B( @; [' A, N( [
直接染色做免疫细胞化学？ 效果怎么样？ 操作有什么不同？有什么注意的？  s7 j( ]1 W; N/ i
确实，爬片太麻烦了

signext

SVZ 发表于 2010-12-14 21:17
0 G6 ~1 D" A' g  X0 v呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

* k0 ], M7 ^/ r& p" S. n直接染色做免疫细胞化学？ 效果怎么样？ 操作有什么不同？有什么注意的？  E: B1 b6 J1 v. G
确实，爬片太麻烦了