3 inhibitors medium used for rat ESCs

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7 N4 E3 j! Q9 ^这个太贵，用起来成本太高！: y- M9 g6 N/ j8 e
其实自己买2i添加就很好了，一般情况2i已足够好了，有钱可以加3i，俺试过，加了2i的培养基就已经90%以上的小鼠胚可以诱导出非常高校ES了，有了2i使得做ES细胞株犹如家常便饭，非常powerful。& R! u9 r$ m& C' H: ^: D
2i::  PD0325901, 1 mM with CHIR99021, 3 mM.  

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回复 carolshen 的帖子; e8 }# T: x1 ?7 R6 A' {$ g
9 u* I' B* a  f! a% g
2i对哺乳类有效，对鸡ESCs是否有效很难说，鸡ESCs的调控好像研究的不大清楚？; C* F  H1 I. }- R6 S
你需要试不同的inh组合和浓度，对不起，俺对鸡ESCs没有研究。

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1 s' N5 c) T6 c' `+ ]
# G$ W; I" ]# ^3 X0 G. r( a; `用Invitrogen的KSR加LIF再加2i，在有feeder的情况下，可以非常有效的抑制从3.5ICM诱导ES过程中细胞的分化，普通的ES培养没有必要添加2i，当然加了更好。

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! R; O# {" u$ l/ i6 R2 O8 h8 c
9 G  B, U  n: L9 g5 K3 O! I鸡的ES细胞还是有些报道的，法国的Pain做的还可以啊，貌似并不复杂，你俺他们的方法拿不到ES细胞？5 K. ^6 |, `" G$ A/ q3 P/ W
国内浙大张才桥等人好像也在弄这个，问问他们，没必要这么浪费钱，调控通路不大一样，大鼠和小鼠都差别老大呢，有哪钱不如自己做点实验，找出更有效的细胞因子，这本身就可以发paper，呵呵。

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- w8 [0 `& c6 n& A/ B# J/ ?# |3 P  Q
. j" z0 l( W; _% c! |( V' a你可以找日本広島大学 松田治男（Haruo Matsuda已退休）或古澤修一（Furusawa, Shuichi）要点鸡的LIF或表达载体，自己纯化，在加2i或3i，bFGF之类的因子试一下，看看效果，看起来不难，这个ES培养看起来比PGC培养更容易！Pain 还有Petitte都是Etches R的人，但比Etches R还是差了一大截，可惜Etches搞公司去了。不管是Pain ，Petitte还是Furusawa水平都挺一般，所以这个鸡的ES培养因该是很简单的打酱油没问题。

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. c) |! J. V$ A% I十几年前，见过这些人，当时觉得都是牛人，可十几年过去了，这些人几乎都没长进，再看一下，基本都是土人了，呵呵。