3 inhibitors medium used for rat ESCs

carolshen

9 A6 v' f* i+ u" v0 W/ X. w0 |  j5 ~! d2 @/ ]( |% ?7 ?& u
据说应其龙的3i 培养基，现以由millipore代其生产，但苦于查找不到，所以在此咨询下，不知有人定过商品化的3i medium ，有的话给个这方面的信息吧 ，谢谢啦

carolshen

自己顶下 呵呵  希望有知道的给个提示哈

carolshen

自己已经找到了答案 也公布下，希望对他人有所帮助，这些产品在stem cells公司有售，网址链接如下：  `6 z$ H# j8 _8 E) Q5 G
http://www.stemcellsinc.com/Tools-and-Technologies_SC-Proven-Product-Catalog/istem

ppcl2

回复 carolshen 的帖子) o; M- t5 R' f' N6 s$ y9 N! j

5 t2 m! B! I, d  q这个太贵，用起来成本太高！$ }3 Q( L: o7 y7 ~* V
其实自己买2i添加就很好了，一般情况2i已足够好了，有钱可以加3i，俺试过，加了2i的培养基就已经90%以上的小鼠胚可以诱导出非常高校ES了，有了2i使得做ES细胞株犹如家常便饭，非常powerful。
  ^7 i' c# h4 o* `/ Y. u2i::  PD0325901, 1 mM with CHIR99021, 3 mM.  

carolshen

回复 ppcl2 的帖子
8 G0 \! c8 }7 ]- n& n8 i0 |$ }/ t1 @# p9 T( A1 H5 D. r
嗯 你是做小鼠的吗？
0 Z% \1 K+ R  w4 _' @9 @" U我们课题组要做鸡ESCs，对于这个配方不清楚它的作用有多大，所以老板让试一下已经商品化的这个产品，如果有效果了，自己再配。可以把你自己的配方发我一下，学习下吗？+ Y. p8 i2 o! O/ |& J% b' P
我的邮箱是：shf222@gmail.com3 @% U* h- V# N2 D
可以在你的回信中简单介绍下你吗，以及你现在的课题，相互交流下 ，主要是我向你学习学习了 呵呵，我刚起步。 如果可以的话！: U* M1 @2 N: z0 W
谢谢哈！

ppcl2

回复 carolshen 的帖子* F3 N; _4 a8 b; Z0 h

  I9 f1 [0 S7 o. \2i对哺乳类有效，对鸡ESCs是否有效很难说，鸡ESCs的调控好像研究的不大清楚？. A" J5 S# s4 E; ?: J
你需要试不同的inh组合和浓度，对不起，俺对鸡ESCs没有研究。

carolshen

回复 ppcl2 的帖子4 n0 E$ m' B* |6 ~% B7 e0 i

9 ?0 x" y! C2 @没关系的，我是借鉴小鼠，大鼠和人的方法去尝试的，毕竟是一种尝试嘛，所以就想问问你的实验方面的 呵呵

huanmiao2005

请问楼上的 在knockout的培养基中直接加入2i 就能保持MES未分化吗 还是要用N2B27呢4 M! s! ~: ]( j& F* Y5 {- L3 h

ppcl2

回复 huanmiao2005 的帖子: T5 ^0 _8 D- [
1 _1 ]3 V" j; o0 Z
用Invitrogen的KSR加LIF再加2i，在有feeder的情况下，可以非常有效的抑制从3.5ICM诱导ES过程中细胞的分化，普通的ES培养没有必要添加2i，当然加了更好。

ppcl2

回复 carolshen 的帖子
+ }# U( ]% H$ Q( o6 F: }0 j2 |- ~& C; x7 H
鸡的ES细胞还是有些报道的，法国的Pain做的还可以啊，貌似并不复杂，你俺他们的方法拿不到ES细胞？
+ e/ w$ b6 I" c4 n! W* M+ r国内浙大张才桥等人好像也在弄这个，问问他们，没必要这么浪费钱，调控通路不大一样，大鼠和小鼠都差别老大呢，有哪钱不如自己做点实验，找出更有效的细胞因子，这本身就可以发paper，呵呵。