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能否传代?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-12-5 21:41 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我用培养皿养的小鼠骨髓间充质干细胞,已经第九天了。很奇怪的是培养皿中间的地方细胞很少,周边的细胞密集,大概融合90%,有些细胞有分支,好像已经分化了。传代好像细胞数不够,我想把它先消化下来再加培养基养,不知道可不可以?
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优秀会员

沙发
发表于 2010-12-6 09:19 |只看该作者
80%--90%就应该可以传了
1 g; Z9 j7 ?5 P$ @) n
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藤椅
发表于 2010-12-6 13:46 |只看该作者
干细胞培养融合在70-80%就可以传代了
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板凳
发表于 2010-12-6 15:06 |只看该作者
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回复 呼吸 的帖子! [9 p% g4 Q- L  Y* o+ }5 X  W

' T% f; k% z% i  g只是局部可以达到90%,有些地方数量就很少
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报纸
发表于 2010-12-7 08:36 |只看该作者
不知道是否可以用酶消化下来,记P1继续养就是了
# }) k9 g, S4 s1 K) Z# Y2 s6 N
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地板
发表于 2010-12-7 09:03 |只看该作者
这个密度可以传代了,你可以根据细胞总量再重新按密度接种相应面积的培养瓶或平皿啊,并不是都没长满就不传代了,局部太满有些细胞就没空间伸展了。
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发表于 2010-12-7 10:38 |只看该作者
回复 gaorongbest 的帖子0 o# N" f* D% y3 I5 i; d

8 y0 O( ~" O) x; c2 p. s' I" k哦,我试试看吧

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发表于 2010-12-8 21:27 |只看该作者
如果是在非条件培养基内,原代细胞一般不分化的,你看到的是可能是造血干细胞分化而来的树突状细胞,这种细胞较间充质细胞偏大,细胞周边可明显见伪足状突起。间充质细胞是比较容易贴近瓶壁生长,你在接种时可预先往培养瓶中加入部分培养基再接种细胞,轻轻吹匀,可避免只在边界生长的情况。一般等到原代细胞贴壁85%左右再传代比较好,我分离了几次骨髓间充质干细胞,发现原代细胞生长比较缓慢,过早传代可能不利于细胞生长。个人经验,仅供参考,祝实验顺利
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发表于 2010-12-9 00:32 |只看该作者
我养的骨髓间充质干细胞也是不均匀,有些地方很密(少数),有些很稀疏,也不知道该不该消化一下。我也是养在培养皿的,但似乎是中间密的多一些,该怎么预防这种疏密不均呢?
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发表于 2010-12-9 16:57 |只看该作者
80%左右传代最好,你的细胞之所以不均匀是传代时在放置到培养箱之前没有混匀,多前后摇晃下,千万不要打转
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