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能否传代?   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-12-8 21:27 |显示全部帖子
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如果是在非条件培养基内,原代细胞一般不分化的,你看到的是可能是造血干细胞分化而来的树突状细胞,这种细胞较间充质细胞偏大,细胞周边可明显见伪足状突起。间充质细胞是比较容易贴近瓶壁生长,你在接种时可预先往培养瓶中加入部分培养基再接种细胞,轻轻吹匀,可避免只在边界生长的情况。一般等到原代细胞贴壁85%左右再传代比较好,我分离了几次骨髓间充质干细胞,发现原代细胞生长比较缓慢,过早传代可能不利于细胞生长。个人经验,仅供参考,祝实验顺利
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沙发
发表于 2010-12-20 20:08 |显示全部帖子
回复 清影 的帖子
+ E* [8 y, G, e- i4 ?
+ l3 H0 W( L1 u2 @+ h' P8 ]只要是它增殖就不会分化,不加条件培养基一般不会分化。传代时依据上一代细胞数不同来观察融合时间,一般就是24-36小时肯定就铺满了。培养多少代就不知道了,反正我养过7代的,长势依然不错,形态学没有改变
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藤椅
发表于 2010-12-22 22:28 |显示全部帖子
回复 清影 的帖子1 {# O7 Z8 c7 y4 w/ `! @
! R- y+ b1 `6 ?' A
我们不对未分化的细胞考察,一般就是观察形态学后进行流式细胞术鉴定,达到纯度后就进行诱导转分化,将转分化的细胞进行免疫荧光染色,流式细胞术鉴定,Real-TimePCR等检测,如有需要会涉及特异性蛋白的Westernblotting检测,基本就这些喽
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